低聚木糖糖基化改性酪蛋白的功能特性及应用

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Cantarali
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究得到“十三五”重点研发项目(2017YFD0400603)的支持。酪蛋白生产工艺简单、成本低廉、氨基酸组成丰富、营养价值高,是特医食品中最常用的蛋白质组件。但由于其在等电点、高温和高盐浓度下的不稳定性限制了其广泛应用,因此有必要通过一些修饰方法来增强酪蛋白的稳定性和功能特性。低聚木糖的甜味类似蔗糖,粘度低,且随温度升高而下降,在高温和较宽的p H范围内稳定,可促进肠道益生菌增殖。糖基化反应在受控条件下可以毫无阻碍地进行,既不需要添加化学试剂,也不会产生有害的次级化合物,可以优化蛋白质的功能特性,产生一种新的蛋白质-糖共聚物,广泛应用于多个领域,且糖基化后具有更高的p H稳定性、热稳定性和储藏稳定性等性能。因此,本研究利用低聚木糖将酪蛋白进行糖基化改性,探究二者糖基化反应的机制和对酪蛋白功能特性的影响,并应用于全营养特医食品乳剂中,研究其对乳液稳定性的影响。主要研究内容包括以下三个方面:(1)以酪蛋白和低聚木糖作为底物进行美拉德反应,对不同底物混合比例和不同反应时间下产物的接枝度、褐变程度、色度以及粒径和电位的变化进行测定和表征。结果发现随着反应时间和糖比例的增加,接枝度、褐变程度均呈上升趋势,当酪蛋白:低聚木糖(w/w)为1:3时,接枝率最高可达64.25±2.23%,色度的实验结果显示糖基化产物的亮度变暗、黄度增加,与Amadori产物的形成呈正相关。粒径大小随二者的增大而减小,糖基化产物溶液更加稳定,电位的变化不显著。通过SDS-PAGE、傅里叶红外光谱、紫外光谱、内源性荧光光谱和圆二色谱分析糖基化过程中酪蛋白的结构变化。SDS-PAGE条带变浅和上移证明低聚木糖与酪蛋白的成功接枝,大分子聚合物形成;红外光谱、荧光光谱、紫外光谱和圆二色谱中特征峰值的变化和位移表明酪蛋白与低聚木糖发生共价结合,糖基化反应使蛋白质的生色基团暴露,蛋白的构象发生改变,α-螺旋和β-折叠含量降低,无规卷曲增加,由有序变为无序。(2)对酪蛋白、酪蛋白-低聚木糖混合物和糖基化产物的溶解性、持水性、持油性、乳化能力和起泡能力等功能特性的变化进行测定。实验结果发现,糖基化产物的溶解度明显高于纯酪蛋白和未反应混合物的溶解度,表明酪蛋白与低聚木糖接枝产生了具有更高水溶性的化合物;由于大部分混合物在溶液中溶解而非溶胀,无法与更多的游离水结合,从而持水能力下降,但经糖基化改性后,颗粒更小,比表面积更大,持油性更强;乳化性和起泡性能也得到改善,糖基化产物的乳化性在8 h时达到了最大值50.48±0.55 m~2/g,乳化稳定性为78.91±2.61%,与未处理的样品相比,增加了59.34%。通过扫描电子显微镜观察产物微观结构的变化,结果表明接枝聚合后的样品表观形貌趋于分散和不均匀,促进了结合物和水之间的相互作用,证明了溶解度的提升。利用差示扫描量热仪测定了糖基化改性对酪蛋白变性温度的影响,结果表明糖基化反应提高了蛋白的变性温度和焓值,热稳定性增强。采用气相色谱-质谱联用测定了糖基化前后挥发性风味成分的变化。分析结果显示,改性后的蛋白风味物质的含量和种类增加,有积极影响。(3)制备分别以酪蛋白、酪蛋白-低聚木糖混合物和酪蛋白-低聚木糖共聚物为蛋白组件和乳化剂的全营养特医食品乳剂,选用大豆油作为油脂组件。利用激光共聚焦显微镜观察乳液的微观形态,通过测定粒径、电位、流变学特性、浊度等指标来评价乳液的p H稳定性、离心稳定性、热稳定性、稀释稳定性和储藏稳定性。结果发现共聚物中糖链的空间网格结构减少了液滴在浓溶液中的扩散,稳定了液滴之间的接触,从而提高了乳液的稳定性,糖基化反应可以降低酪蛋白的等电点,增强乳液的p H稳定性。稀释倍数过大会导致溶液中蛋白质浓度过低,水相和油相之间不能产生强的界面张力,导致使油滴聚集,乳液体系不稳定。随着储藏时间和温度的增加,酪蛋白和酪蛋白-低聚木糖混合物乳剂会凝结成冻状、粒径增大到2000 nm以上,电位绝对值减小,粘度和浊度增大,而糖基化产物乳剂稳定性良好,所有指标均无显著变化。
其他文献
报纸
为建立鉴别检测犬瘟热病毒(CDV)和犬冠状病毒(CCoV)的方法,本研究采用PCR方法分别扩增CDV N基因和CCoV S基因,并克隆至p MD18-T载体中构建重组质粒pCDV-N、p CCoV-S,均经PCR和测序鉴定后测定浓度作为质粒标准品。同时针对CDV N基因和CCoV S基因设计特异性引物和TaqMan探针,采用方阵试验对各反应条件的优化,建立了同时检测这两种病毒的双重TaqMan荧光
期刊
在工业生产过程中,为了进一步提升企业的经济效益,很多工业企业开始采用用电降耗技术来降低生产成本。现阶段,节能降耗已经成为很多工业企业的一项重要发展举措。基于此,文章首先分析了工业企业的用电现状,然后对工业企业节电的必要性展开了分析,最后重点分析了工业企业用电降耗的相关策略,期望为促进工业企业发展提供参考。
期刊
犬冠状病毒病是犬的一种传染性疾病,可引起犬急性肠炎。在临床上,犬冠状病毒(canine coronavirus,CCo V)常与其他肠道传染病的病原混合感染,患病犬可出现全身性的临床症状。近年来,已有关于CCo V变异株的报道,此变异株可感染不同年龄段的犬,发病率和死亡率较高,给宠物犬带来巨大的危害。目前,CCo V的检测方法有普通RT-PCR、胶体金试纸等,当病毒含量较低等严苛检测条件时,这些检
学位
<正> 单位产品电耗的统计考核工作是用数字语言表达事实的。它也是全面检查企业电力使用得是否合理和节约的最科学的方法。为此,企业必须具备完整的管电体系和拥有一定业务素质的统计人员。近来,不少企业和用电监察人员感到对企业用电管理统计分析、对节电效果的计算不一等问题。针对企业用电分析统计分析薄弱现状,笔者阐述了基本方法,以供参考。
期刊
如今,个人信息安全逐渐成为社会热点问题。在金融安全、访问控制和资料保密等场景都需要身份识别技术来确保信息安全。当前,生物特征已成为身份识别技术的主要载体,如人脸、指纹、虹膜等,但此类生物特征存在易丢失、易盗用以及存在损伤风险等缺点。心电图(Electrocardiograph,ECG)信号极难伪造、形态稳定,而且是一维信号,便于存储、计算和处理,可补充现有生物特征无法满足的身份安全需求。ECG身份
学位
快节奏的生活让越来越多的人们不堪重负,疾病缠身,尤其是罹患心血管疾病的患者数量也逐年增多,心血管疾病是全球第一大死亡疾病,其中最严重的疾病之一为心律失常,每年都有大量患者因此丧生,但受到人口、教育等因素的影响,开展心律失常诊疗的机构数量却远远不足患者的数量,要想在有限的医疗资源下救助更多的人,心血管疾病的预警非常重要,此时就需要计算机实现心率失常的自动诊断来辅助医师进行诊疗。目前主流的心律失常分类
学位
本研究受国家自然科学基金面上项目(31571939)资助。丙烯酰胺(Acrylamide,AA)是食品热加工形成的内源性污染物,具有神经毒性、遗传毒性、生殖毒性、肝毒性和潜在的致癌性。研究表明,AA通过被动过程被肠道迅速吸收到血液中,对小肠黏膜的结构和功能均有负面影响,引起肠道屏障泄露,而肠道屏障受损多与菌群易位相关。肠道菌群通过调节肠道通透性、免疫反应及代谢过程与宿主互利互惠,并通过产生短链脂肪
学位
情感人机交互应用于驾驶员情绪检测、情感辅助机器人、课堂学生听课状态监测等领域,是人工智能的重要组成部分。情感识别研究已成为当前人工智能领域的一大热点。相较于脸部表情、语音等表层信号,基于生理信号的情感识别更具备真实性和可靠性。基于生理信号的情感识别多以脑电信号或者融合生理信号为研究对象,基于单模心电信号的情感识别研究较少。近年来,基于脑电图的情感识别研究取得了不错的进展,但是脑电信号的采集需要在头
学位
顺应新课改的要求,国家“双减”政策的颁布对中小学教师提出了更新的要求和更高的挑战。数学作业是小学数学教学中重要的组成部分,对学生课堂所学知识的巩固和检验起着举足轻重的作用。在“双减”政策下,教师要从小学数学的学科特点和小学生的个性特征出发,优化设计出高质量的数学作业,在尽可能减轻学生作业负担的前提下,高度关注小学生数学关键能力和核心素养的提升,最终实现“减负、增效、提质”三位一体的教学效果。
期刊