【摘 要】
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本研究的主要目的是筛选和鉴定产细菌素的乳酸菌菌株、优化发酵条件以提高细菌素的活性并探讨粗细菌素的生物学特性。 本试验从乳酸酸菜发酵液中筛选到8株产细菌素的乳酸
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本研究的主要目的是筛选和鉴定产细菌素的乳酸菌菌株、优化发酵条件以提高细菌素的活性并探讨粗细菌素的生物学特性。 本试验从乳酸酸菜发酵液中筛选到8株产细菌素的乳酸杆菌菌株HDRS1~HDRS8,根据形态特征观察,常规生理生化鉴定,API 50 CH试剂条鉴定和16S rDNA序列分析,确定HDRS1~HDRS7为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),HDRS8为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。 在排除过氧化氢和有机酸对指示菌的抑制作用后,HDRS1和HDRS8菌株的发酵液对指示菌均有强烈的抑制作用。而经胰蛋白酶和蛋白酶K处理后,发酵液抑菌活性明显下降,证明HDRS1和HDRS8的发酵液中含有蛋白质性质的抑菌物质,即细菌素。 本研究探讨了营养要素(包括培养基组成和不同的起始pH值)和环境要素(包括培养温度、装液量和接种量)对细菌素产生的影响,以求得产生细菌素的最佳发酵条件。正交试验得出HDRS1产细菌素的最佳营养要素和环境要素为:蔗糖2%,牛肉膏2.5%,吐温80 0.1%,pH6.5,30℃培养,80mL/100mL装液量;HDRS8产细菌素的最佳营养要素和环境要素为,葡萄糖2%,牛肉膏2.5%,吐温80 0.1%,pH6.5,37℃培养,40mL/100mL装液量。 分别取HDRS1和HDRS8在对数期和稳定期的发酵液进行抑菌试验,确定对数期的细菌素产量较高。比较了四种不同的菌种保藏方法,结果发现用螺口试管穿刺法保藏HDRS1和HDRS8菌种效果最好,有效保藏时间在5个月以上。 粗细菌素的生物学特性研究表明,HDRS1和HDRSD8产生的细菌素在微酸性条件下抑菌活性较高,在pH为5.0时活性最高,显示活性
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