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第一部分:温缺血对大鼠肺血管及支气管结构和舒缩功能的影响
目的:运用器官浴槽方法研究30min、45min及60min的温缺血对大鼠肺动脉血管及支气管的组织结构及舒张和收缩功能的作用,从基础结构和功能方面阐述温缺血对大鼠无心跳供体肺的影响。
方法:将40只大鼠随机分为有心跳供体组、温缺血30min的无心跳供体组、温缺血45rain的无心跳供体组及温缺血60min的无心跳供体组。用大鼠的离体左肺制备血管环及支气管环,运用器官浴槽方法检验其舒张和收缩能力并进行对比。
结果:温缺血30min、45min和60min的无心跳供体组与有心跳供体组相比,各组血管环和支气管环的预收缩值的差异均没有统计学意义(P>0.05);而在血管内皮依赖性舒张反应方面,温缺血30min和45min的无心跳供体组与有心跳供体组的差异没有统计学意义(P>0.05),温缺血60min的无心跳供体组与有心跳供体组的差异有统计学意义(P<0.05);在支气管上皮依赖性舒张反应方面,温缺血30rain的无心跳供体组与有心跳供体组相比没有统计学差异(P>0.05),温缺血45min和60min的无心跳供体组与有心跳供体组相比其差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,在各组内皮/上皮依赖性舒张期间,组内的空白对照B亚组均未发现自发性舒张。盐酸罂粟碱也引起了所有血管及支气管环平滑肌的完全舒张。
结论:温缺血30min后,无心跳供体大鼠肺血管及支气管的结构及舒缩功能保持完好;温缺血45min后,无心跳供体大鼠肺血管及内皮组织结构和舒缩功能保持完整,支气管非上皮依赖性调节也保持完好,但是支气管上皮及上皮依赖性调节受到破坏;温缺血60min后,无心跳供体大鼠肺血管及支气管平滑肌的舒缩功能仍然保持完整,但是内皮/上皮依赖性调节受到了破坏。
第二部分温缺血对大鼠无心跳供体肺移植后功能的影响
目的:运用大鼠肺移植模型研究温缺血30min、温缺血45min和温缺血60min无心跳供体肺用于移植的可行性,探讨温缺血对移植肺功能的影响及大鼠温缺血时限。
方法:将80只大鼠分为有心跳供体组、温缺血30min的无心跳供体组、温缺血45min的无心跳供体组和温缺血60min的无心跳供体组,供体温缺血期间未采取任何保护措施,采取“两套管一支架管”进行移植,移植后对术后短期存活率,肺顺应性,动脉血气分析,肺水含量和肺组织中能量代谢物含量进行分析对比。
结果:温缺血30min的无心跳供体组与有心跳供体组相比,在移植术后短期存活率、顺应性、血气分析结果、肺水含量和能量代谢物含量方面均没有差异(P>0.05);温缺血45min的无心跳供体组与有心跳供体组相比,在移植术后短期,存活率、结扎后15min和30min的顺应性、血氧分压和氧合指数、肺水含量方面都存在统计学差异(P<0.05),在肺组织能量代谢物含量方面存在显著统计学差异(P<0.01);温缺血60min的无心跳供体组与有心跳供体相比,在移植术后短期存活率、顺应性、血气分析、肺水含量和能量代谢物含量方面均存在显著统计学差异(P<0.01)。
结论:在未施行任何保护措施的情况下,温缺血30min的大鼠无心跳供体肺移植后可获得与有心跳供体肺相似的功能,而温缺血45min和60min的大鼠无心跳供体组移植后功能均不能令人满意;温缺血造成肺组织的严重损伤可能发生在温缺血30-45min期间。
第三部分:表面降温和持续机械通气对大鼠无心跳供体肺的保护作用
目的:运用器官浴槽及肺移植方法从基础结构和移植后功能两方面探讨缺血期间给予局部降温或持续机械通气处理对温缺血60min无心跳供体肺的保护作用。
方法:20只大鼠分为温缺血60min的无心跳供体表面降温组(NHBD-C)和持续机械通气组(NHBD-V),将两组大鼠的离体左肺制备成血管环及支气管环,运用器官浴槽方法检验其舒张和收缩能力,与第一部分结果对照并进行统计学分析。另取40只大鼠也分为温缺血60min的无心跳供体表面降温组和持续机械通气组,配对移植后对术后短期存活率、肺顺应性、动脉血气分析、肺水含量和肺组织能量代谢物含量进行检测并与第二部分结果进行比较及统计学分析。
结果:在器官浴槽研究中,无心跳供体表面降温组和持续机械通气组大鼠肺的血管及支气管的结构和功能与温缺血60min的无心跳供体相比都获得了明显的改善,各项指标在与有心跳供体组相比时均未发现统计学差异(P>0.05);此外,表面降温组的各项数据指标优于持续机械通气组,但其差异无统计学意义(P>0.05)。在原位移植方面,表面降温组和持续机械通气组在移植术后短期存活率、顺应性、血气分析结果、肺水含量和能量代谢物含量方面均比温缺血60min组有了显著的改善,与有心跳供体组相比差异均无统计学意义(P>0.05);而表面降温组的保存效果也好于持续机械通气组,但是其差异无统计学意义(P>0.05)。
结论:表面降温处理和持续机械通气处理都可以保护温缺血60min的大鼠无心跳供体肺血管及支气管结构和功能的完整,使之可以安全运用于移植并获得良好的效果。此外,在本实验条件下,表面降温处理的效果优于持续机械通气处理的效果。