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目的：(1)对正常外周血树突状细胞(DCs)进行分离及纯化,获得较高纯度和活性的DCs。(2)重组人IL-12腺病毒(Adv-IL12)转染肿瘤抗原致敏的树突状细胞,检测树突状细胞分子表型的变化、IL-12的分泌水平及诱导的T细胞对HepG2细胞的杀伤作用。方法：(1)采用Ficoll密度梯度离心法从正常人外周血中分离出单核细胞,联合应用GM-CSF、IL-4和TNF-α三种细胞因子体外培养,促成熟为树突状细胞。(2)培养HepG2细胞,制备肿瘤抗原。(3)重组人IL-12腺病毒(Adv-IL12)与HepG2细胞在6孔板中共同培养,做划痕实验。(4)肿瘤抗原致敏树突状细胞,再用重组人IL-12腺病毒(Adv-IL12)修饰；分组：空白DC组,DC-Adv-GFP组,DC-Adv-IL12组,(5)采用流式细胞技术检测各组DC的细胞表型,ELISA法检测各组上清液中IL-12的分泌水平,MTT法检测T细胞的增殖能力以及细胞毒性T细胞的杀伤效应。结果：(1)细胞划痕实验表明重组人IL-12腺病毒(Adv-IL12)能抑制肝癌细胞的生长。(2)流式细胞技术检测各组DC的细胞表型显示,DC-Adv-IL12组的细胞分子表型比空白DC组明显上调,HLA-DR为(92.3±5.3)%,CD80为(93.8±4.9)%,CD83为(87.3±2.5)%,CD86为(85.7±5.3)%,CD1a为(78.1±4.7)%(P<0.05)。(3)培养6小时的DC,加入肿瘤冻融抗原并经Adv-ILl2修饰,在转染后的12h、24h、48h、72h、96h,ELISA法检测各组上清液中IL-12的分泌水平显示,IL12的分泌逐渐增加,在96h基本达到最高水平。(4)收集各组DC,调整细胞终浓度为1×105/ml接种于96孔板,作为刺激细胞,再在96孔板中加入终末浓度为1×106/ml的T细胞,作为应答细胞,共同培养3天,MTT法检测DC刺激T细胞增殖能力,空白DC组(0.53±0.08),DC-Adv-GFP组(0.77±0.05),DC-Adv-IL12组(1.08±0.07),结果显示,DC-Adv-IL12组能显著增强T细胞的增殖能力。(5)T细胞与各组DC以比例20：1接种于24孔板,共同培养3天,收集细胞毒性T细胞作为刺激细胞,而将HepG2细胞作为应答细胞,按效靶比10：1、20：1、40：1的比率接种于96孔板,终末体积为200gm,共同培养24小时,MTT法检测细胞毒性T淋巴细胞对HepG2细胞的杀伤效应,结果显示,相同效靶比时,DC-Adv-ILl2组的细胞毒性T细胞的杀伤效应明显高于其他各组(P＜0.05),同时也显示,效靶比越高,细胞毒性T细胞的杀伤效应越强。结论：(1)重组人IL-12腺病毒(Adv-IL12)与HepG2细胞共同培养时能抑制肝癌细胞的生长,加速肿瘤细胞的凋亡。口重组人IL-12腺病毒Adv-IL12)在体外能有效的转染树突状细胞,并分泌较高水平的IL-12,增强细胞毒性T细胞的杀伤效应。