肿瘤细胞对体外诱导人内皮细胞血管形成的影响及VEGF的作用 前言 肿瘤是典型的血管依赖性病变,即肿瘤的恶性生长和转移依赖于肿瘤血管新生。肿瘤血管新生是在多种因素的严密调控下进行的,是促进血管新生因素和抑制血管新生因素间失衡的结果。所谓肿瘤血管新生是由肿瘤细胞诱导的微血管生长以及肿瘤中血液循环建立的过程,该过程极其复杂,包括血管外基质降解,内皮细胞增殖、分化、迁移,形成管状结构等。新生的肿瘤血管增加肿瘤的血液灌注,促进肿瘤生长、浸润和转移。而抑制肿瘤血管新生进而抑制肿瘤成为肿瘤治疗的新靶点。 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是肿瘤细胞分泌的一种强力的血管生成因子,是高效的内皮细胞有丝分裂原,可直接特异地作用于内皮细胞,对肿瘤血管新生起着关键性的作用,其与肿瘤血管新生的研究已成为热点。本实验在体外培养人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),应用Matrigel建立血管形成的体外培养体系,来研究肿瘤细胞对诱导人内皮细胞血管形成的影响及VEGF的作用,进而探讨VEGF与肿瘤血管新生的关系及其作用机制。 方法 采用改进的Jaffe氏培养法进行HUVECs培养,应用Matrigel诱导内皮细胞形成管腔结构,建立血管形成的体外培养体系,然后施加实验因素。传代培养口腔鳞癌细胞株,待细胞达到亚融合状态后,制备肿瘤细胞条件培养液。第一组实验是动态观察HUVECs在Matrigel上形成管腔结构的情况。第二组实验分为对照组(无血清DMEM培养液)和不同浓度的肿瘤细胞条件培养液作用组(肿瘤细胞上清液与DMEM培养液比分别为1:2、1:1、2:1),作用24小时。第三组实验为肿瘤细胞条件培养液(肿瘤细胞上清液与