目的:观察不同浓度HIMF是否均可以引起大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,且增殖程度是否有差别,进而验证该过程是否是通过激活PI3K/Akt/mTOR及PKC/MAPKs信号通路进行的,且这一过程是否受Ca²⁺所调控。方法:（1）提取、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞:采用酶解法成功分离大鼠肺动脉平滑肌细胞,在光镜下观察细胞形态,用纤维性肌动蛋白细胞（F-actin）进行标记的细胞免疫学法进行鉴定。取培养状态良好的2-3代细胞置于37℃,5%CO₂的培养箱中孵育。（2）取对数生长期的2-3代大鼠PASMCs细胞,用EdU免疫荧光法检测加入不同浓度重组蛋白HIMF后大鼠PASMCs增殖的情况。（3）研究大鼠肺动脉平滑肌细胞中Ca²⁺相关信号通路PI3K/Akt/mTOR及PKC/MAPKs的磷酸化情况:分别加入信号通路各因子抑制剂后,再加入20 ng/ml重组HIMF蛋白20分钟后,用免疫蛋白印迹（Western blot）方法检测下游因子磷酸化的表达,并用EdU免疫荧光法检测细胞增殖的情况。结果:（1）在大鼠PASMCs中加入不同浓度的重组蛋白HIMF后,通过EdU免疫荧光染色可以发现,细胞增殖较空白对照组均明显增强,且D组（20 ng/ml）细胞增殖的增强程度最为明显。（2）（1）分别加入细胞内外钙离子螯合剂EGTA及BAPTA后,再加入20 ng/ml重组HIMF蛋白,下游因子PI3K磷酸化较仅加入重组蛋白组减弱;（2）加入PI3K抑制剂LY94002后,再加入20 ng/ml重组HIMF蛋白,下游Akt因子磷酸化较仅加入重组蛋白组亦减弱（3）加入Akt抑制剂KRX-0401后,再加入20 ng/ml重组HIMF蛋白,下游因子mTOR磷酸化较仅加入重组蛋白组减弱（4）上述各组与仅加入20ng/ml重组HIMF蛋白相较,细胞增殖均有所减弱。（3）（1）加入细胞内外钙离子螯合剂EGTA及BAPTA后,再加入20 ng/ml重组HIMF蛋白,下游因子PKC磷酸化较仅加入重组蛋白组减弱;（2）加入PKC抑制剂LY317615后,再加入20 ng/ml重组HIMF蛋白,下游MAPKS因子磷酸化较仅加入重组蛋白组亦减弱;（3）上述各组与仅加入20 ng/ml重组HIMF蛋白相较,细胞增殖均减弱。结论:HIMF重组蛋白可引起大鼠肺动脉平滑肌细胞的增殖,这一作用很可能是通过激活PI3K/Akt/mTOR及PKC/MAPKs信号通路来实现,并受Ca²⁺所调控。