NGAL在肾小管上皮细胞内质网应激后的改变和意义

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目的:观察毒胡萝卜索引起肾小管上皮细胞内质网应激后NGAL的改变及意义。  方法:①MTS法测定毒胡萝卜素的最佳给药浓度;②构建内质网应激模型,Western-blot检测模型指标,验证模型构建情况(ER模型建立成功的检测指标:Western-blot检测内质网应激蛋白CHOP、GRP78表达水平);③实验分组:对照组——正常人肾小管上皮细胞,实验组—加毒胡萝卜素组;④利用Western-blot检测实验组与对照组细胞中NGAL蛋白的表达情况。  结果:①毒胡萝卜素的最佳给药浓度分别为2.5μmol/L和5μmol/L,分别作用4小时和8小时。②与对照组细胞中内质网应激指标CHOP和GRP78蛋白的表达量比较,实验组CHOP高达(0.996±0.064)、GRP78为(0.951±0.028)显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。③与对照组细胞中NGAL蛋白的表达量比较,实验组表达量显著增加,并随着内质网应激的加重增加的更为明显,差异显著(P<0.05)。  结论:①用毒胡萝卜素诱导正常人肾小管上皮细胞,能够发现内质网应激现象。②用毒胡萝卜素刺激正常人肾小管上皮细胞时,可引起CHOP、GRP78和NGAL表达量的增加;并随着内质网应激的加重,NGAL增加的更为明显。③在内质网应激发生的同时,伴有NGAL表达量的增加,两者可能存在相关性。
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