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背景和目的：越来越多的研究表明肝再生障碍是肝衰竭患者死亡的一个主要原因,但目前国内外对肝衰竭患者肝再生障碍的机制并不清楚。本研究通过体外实验,探讨肝衰竭患者血浆对HepG2细胞生长及增殖的影响,并进一步探讨其对HepG2细胞内细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin-dependent kinase 4, CDK4)表达的影响,初步了解肝衰竭患者肝再生障碍的原因及机制。方法：(1)血浆置换时收集肝衰竭患者血浆、肝素抗凝；(2)应用MTT法检测50%肝衰竭患者血浆对HepG2细胞生长和增殖作用,并与正常对照血浆及小牛血清做对照；(3)分别使用5ng/ml表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF), 10ng/mlEGF, 20ng/mlEGF刺激50%肝衰竭患者血浆培养的HepG2细胞,并观察细胞生长及增殖情况；(4)采用Hoechst染色法观察肝衰竭患者血浆对HepG2细胞凋亡的诱导；(5)采用Western-blotting(WB)技术检测肝衰竭患者血浆对HepG2细胞内Cyclin D1、CDK4蛋白表达的影响。结果：(1)MTT比色法结果表明,与正常对照血浆比较,肝衰竭患者血浆在体外对HepG2细胞生长及增殖有明显的抑制作用,在作用12h后,有统计学意义(P<0.05)，且这种抑制作用呈现时间依赖性；(2)EGF对正常对照组HepG2细胞的生长及增殖有明显促进作用,但仅大剂量EGF对肝衰竭组HepG2细胞生长和增殖有一过性刺激作用。与EGF刺激正常对照组比较,肝衰竭组各时间点细胞生长与增殖仍受到明显抑制。(3)形态学观察：Hoechst凋亡染色结果表明,肝衰竭患者血浆作用于HepG2细胞后,细胞凋亡率无明显增加(P>0.05)；(4)WB结果显示,随着作用时间的延长,肝衰竭患者血浆抑制HepG2细胞内Cyclin D1、CDK4的表达。结论：肝衰竭患者血浆对HepG2细胞生长及增殖具有较强的抑制作用,大剂量EGF对肝衰竭患者血浆培养的HepG2细胞增殖虽有一过性刺激作用,但并不能逆转其抑制作用；肝衰竭患者血浆抑制HepG2细胞生长和增殖的机制可能与其抑制细胞内Cyclin D1、CDK4的表达有关。