【摘 要】
:
研究背景:支气管哮喘(简称哮喘)是一种难治的肺疾病,困扰着全球数亿的患者。气道炎症反应的持续进展是气道重构等哮喘病生理学的主要特征。研究表明,气道上皮粘膜损伤后得不到及时修复是导致炎症反应持续存在的原因之一。因此恢复完整的气道上皮黏膜,终止损伤的上皮细胞对哮喘气道炎症反应的促进作用至关重要。大量研究表明,气道黏膜存在着上皮祖细胞Club细胞,能够增殖或分化成纤毛细胞重建受损的支气管上皮屏障。细胞自
论文部分内容阅读
研究背景:支气管哮喘(简称哮喘)是一种难治的肺疾病,困扰着全球数亿的患者。气道炎症反应的持续进展是气道重构等哮喘病生理学的主要特征。研究表明,气道上皮粘膜损伤后得不到及时修复是导致炎症反应持续存在的原因之一。因此恢复完整的气道上皮黏膜,终止损伤的上皮细胞对哮喘气道炎症反应的促进作用至关重要。大量研究表明,气道黏膜存在着上皮祖细胞Club细胞,能够增殖或分化成纤毛细胞重建受损的支气管上皮屏障。细胞自噬是一种应激反应诱导的细胞自我保护机制,已有研究提示,哮喘发生与细胞自噬缺失有关,葡萄糖剥夺可诱导细胞自噬,细胞自噬激活后可反馈调节细胞的葡萄糖摄取。那么在哮喘的炎症反应中,细胞自噬和葡萄糖代谢对Club细胞功能有怎样的调控作用,是否会影响其增殖和分化功能,以及如何参与气道上皮损伤后的修复进程,是本研究的主要内容。研究方法:本研究采用流式细胞分选结合体外3D类器官培养的方法,通过统计细胞的克隆形成率和克隆直径研究Club细胞的增殖情况;用RT-PCR的方法,从m RNA水平分析Club细胞的分化情况;野生型小鼠流式分选出Club细胞,通过在其体外3D类器官培养中增添小分子自噬激活剂(Spermidine)或小分子自噬抑制剂(3-MA,Bafilomycin),或利用Scgb1a1-cre ER;Atg5f/f转基因小鼠模型敲低自噬基因Atg5,研究自噬对Club细胞增殖和分化的影响;采用2-NBDG荧光示踪法,研究细胞自噬对Club细胞葡萄糖摄取的调控;利用Scgb1a1-cre ER;Glut1f/f转基因小鼠模型敲低Glut1或者调节培养基中的葡萄糖的浓度,研究葡萄糖摄取对Club细胞增殖分化的影响;通过在培养基中加入小分子糖酵解通路抑制剂2-DG,研究葡萄糖代谢对Club细胞增殖分化的影响。研究结果:1.流式分选野生型小鼠Club细胞,经体外3D类器官培养,表明小分子自噬激活剂(Spermidine)对于Club细胞的增殖能力有促进作用,对于其向纤毛细胞和杯状细胞的分化有抑制作用;自噬抑制剂(3-MA或Bafilomycin)抑制Club细胞的增殖,促进其向纤毛细胞和杯状细胞分化。流式分选Scgb1a1-cre ER;Atg5f/f小鼠(tamoxifen预处理)的Club细胞进行体外3D类器官培养,与对照组Atg5f/f小鼠相比,自噬基因Atg5敲低抑制Club细胞的增殖,促进其向纤毛细胞和杯状细胞的分化。2.采用2-NBDG荧光示踪法比较Scgb1a1-cre ER;Atg5f/f小鼠Club细胞与Atg5f/f小鼠Club细胞的摄糖情况,结果显示,自噬基因Atg5敲低后,Club细胞对葡萄糖的摄取能力有下降趋势。3.利用Scgb1a1-cre ER;Glut1f/f条件性敲除小鼠模型选择性敲低Club细胞Glut1基因,发现Glut1敲低导致Club细胞增殖能力下降,向纤毛细胞和杯状细胞的分化增强。4.体外3D类器官培养发现,逐渐降低葡萄糖浓度促进Club细胞增殖,向纤毛细胞和杯状细胞分化减弱。但是进一步降低甚至剥夺葡萄糖,Club细胞增殖能力下降,加速向纤毛细胞和杯状细胞分化。低浓度糖酵解抑制剂2-DG促进Club细胞增殖;高浓度2-DG情况下Club克隆增殖下降,向纤毛细胞和杯状细胞的分化增强。研究结论:细胞自噬促进Club细胞的增殖,抑制其向纤毛细胞和杯状细胞的分化。自噬基因Atg5敲低后,Club细胞的葡萄糖摄取能力有降低趋势。Glut1基因敲低、阻断糖酵解或葡萄糖剥夺抑制Club细胞的增殖,促进其向纤毛细胞和杯状细胞的分化。这些结果证明细胞自噬和葡萄糖代谢在气道祖细胞即Club细胞再生修复上皮黏膜中发挥重要作用。
其他文献
工会是职工本着自愿本心结合的工人阶级的群众组织。工会是被工会会员和企业职工所依赖的一级组织,在劳动关系、职工利益等很多方面都发挥着不可替代的作用。身为会员和职工利益的代表,要切实保障困难职工得到及时、有效、精准的帮扶服务。但是在目前的工会帮扶工作中普遍存在着基层业务工作人员业务工作能力不强,调查摸底工作不够规范、精准,导致困难职工的识别不够准确,困难职工不能清晰的知晓帮扶政策,帮扶资金使用不合理、
目的:观察自拟通乳化痈汤对初期外吹乳痈气滞热壅证患者的临床疗效。方法:将符合标准的60例气滞热壅证外吹乳痈患者,随机分为试验组与对照组各30例。试验组30例给以口服自拟通乳化痈汤中药汤剂;对照组30例使用注射用头孢唑林钠静脉滴注。两组患者均治疗3天观察并统计疗效。结果:1.主要疗效观察指标:(1)体温:采用配对t检验比较治疗前、后体温的变化情况,结果显示试验组治疗前、后体温存在显著差异(t=5.4
PPP,即政府和社会资本合作,作为公共基础设施中的一种项目融资模式,这些年成为了中国经济的“新宠”。广义上讲,PPP指政府和社会资本通过建立各种合作关系,来提供公共服务或
目的:研究分消走泄法治疗慢性心力衰竭(Chronic Heart Failure,CHF)利尿剂抵抗的临床疗效,并讨论药物对神经-体液调节机制的影响。方法:选取42例CHF伴利尿剂抵抗患者,随机分为对照组和试验组,每组21例。对照组给予利尿剂标准治疗,同时给予自制的中药安慰剂;试验组在西医标准治疗的基础上按照传统中医分消走泄法给予中药治疗。治疗周期均为2周,记录患者治疗前后滤过钠排泄分数(FENa
含氮有机化合物是独特的一类有机化合物。由于它们分子中含有的氮原子具有独特的理化特性,这类化合物也普遍具有与众不同的生理学活性。在众多的生物分子如:氨基酸、DNA、RNA等中普遍含有数量众多的氮原子。因此开展对含氮类有机化合物的研究就具有十分显著的现实意义。酰胺类化合物是一大类重要的含氮有机化合物。在对酰胺类化合物的研究时发现,此类化合物的生理活性十分显著。目前,有数目巨大的酰胺类化合物已经被应用于
随着现代军事技术的要求,导弹向着高速和高机动性的方向不断发展,这就对拦截弹的机动能力以及制导精度提出了更高的要求。由于传统的导弹不能有效的跟踪制导指令,因此其制导
内蒙古霍布仁布敦野猪沟位于滨太平洋构造域,大兴安岭岩浆岩带,岩浆活动强烈,广泛出露。本文从野猪沟正长花岗岩的野外地质特征、岩石学、地球化学、及锆石U-Pb同位素年代学等方面进行系统的研究,探讨野猪沟正长花岗岩的成因以及形成的构造环境。野猪沟正长花岗岩体侵入上侏罗统满克头鄂博组的流纹质含角砾晶屑岩屑熔结凝灰岩;该岩出露面积约0.14km2,呈岩瘤状产出。岩性主要为中粒含黑云母正长花岗岩、中细粒含黑云
随着移动通信、物联网以及各种电子产业的发展,天线作为其中重要的接收发装置随着电子设备越来越高的集成度发展,在对天线的低剖面小型化设计有了更高的要求。随着超材料(Metamaterials)的快速发展,具有高阻抗和同相反射特性的人工磁导体(AMC)的研究有着快速的发展。人工磁导体可以代替传统的金属板作为天线的反射板,在保证天线性能的同时,降低天线的剖面高度。本文以基于人工磁导体的低剖面天线为研究对象
“互联网+”的发展产生新型交易方式,电子商务的形成推动了社会经济的发展,也给消费者带来了诸多便利。但与此同时,电子商务范围不断扩大,对传统市场发展带来冲击,对法律的制定也带来了挑战。因网络具有虚拟性、流通性等特征,传统交易中存在的问题在电子商务中并没有消失,反而电子商务存在的问题层出不穷,电子商务交易双方权益保护面临更大的挑战。电子商务中,消费者与经营者地位差距缩小,一定程度上突破经营者占据优势地
最近几年,随着计算机视觉的快速发展,包括物体检测、动作识别和分割等在内的计算机视觉识别任务也取得了快速进展。然而为了准确地理解场景中的真实情况,计算机还需要识别人和物体的交互方式,我们称之为人-物体交互行为检测识别。在大多数的场景和应用中,人类是图像语义的交互中心,因此确定图像中人和其他物体的交互关系便成为理解图像语义在工程应用中的关键。本文要解决的人-物体交互行为检测识别任务主要分为目标检测和H