缺血再灌注损伤是血管病变、体外循环、心胸外科手术、组织或器官的移植和再植等创伤及外科手术过程常见的病理改变。研究表明，缺血再灌注损伤的机制与自由基改变、钙超载、炎症反应及细胞凋亡等因素有关。此外还发现，缺血再灌注对肿瘤组织有明显的杀伤和抑制作用，其中氧化损伤和凋亡则是杀伤肿瘤细胞的重要因素，但目前相关研究不多，详细机制并不清楚。因此，缺血再灌注对肿瘤组织的杀伤和对正常组织的影响及其机制如何，以及是否可利用缺血再灌注对肝癌进行治疗，是值得研究的内容。所以我们利用移植性肝癌动物模型，给予缺血再灌注损伤，探讨缺血再灌注对肿瘤组织的影响和机制，以便于为特殊性肝癌的治疗建立新方法打下基础。 目的：通过测定分析肝癌缺血再灌注后正常肝脏组织和肿瘤组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量改变，研究氧自由基的改变和损伤；通过苏木素伊红染色(HE)和荧光法脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)对凋亡细胞进行形态学观察和定量分析，探讨缺血再灌注损伤对肿瘤组织的影响及其意义。 方法：通过超声引导将VX2肿瘤组织混悬液穿刺注射到新西兰兔肝脏左中第四军医大学硕士学位论文叶，建立肝癌模型，用无损伤血管钳阻断肿瘤所在肝叶的肝动脉分支60 min，然后去除血管阻断恢复血流，建立肝癌缺血再灌注损伤模型，并随机将模型动物分为缺血再灌注前(对照)、缺血再灌注后0 min、lh、ld、3d、7d六个时间组，取肝脏组织和肿瘤组织，分别测定分析NO、NOS、iNOS、SOD和MDA含量改变，同时将其依次经福尔马林固定、石蜡包埋、切片、HE染色和TUNEL试验，对比分析研究正常肝脏组织和肿瘤组织中细胞凋亡情况。结果:(1)肝脏组织中的NO含量除缺血再灌注后lh升高外，其余各时间点均低于缺血再灌注前水平，变化幅度较小;肿瘤组织的NO含量于缺血再灌注后0 min开始下降，lh降到最低(只0.01)，随后又有所升高，但至7d时仍明显低于缺血再灌注前水平(只0.01):缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中的NO含量随时间的改变差异非常显著(只0.01)。(2)缺血再灌注后肝脏组织的总NOS含量于0 min时有所降低，但随后恢复，变化幅度较小，而iNOS含量0 min至ld明显下降(只0.01)，其后有所恢复，但仍未达缺血再灌注前水平;缺血再灌注后肿瘤组织的总NOS含量0 min开始下降，0 min至lh低于正常水平，随后开始升高，1一7d明显高于血再灌注前(只0、01)，其中iNOS含量持续上升，至7d明显高于血再灌注前水平 (只0.01);缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中的总NOS和iNOS含量随时间的改变差异非常显著(只0.01)。(3)肝脏组织中的SOD含量于缺血再灌注后迅速下降，随后有所升高，至7d时仍明显低于缺血再灌注前水平，各组与对照组对比差异非常显著(只0.01):肿瘤组织的SOD含量变化趋势除了1h达最低点外其余皆与肝脏组织相似，各组与对照组对比差异非常显著(只0.01):而缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中的SOD含量随时间的改变相对比差异非常显著(只0.01)。(4)缺血再灌注后肝脏组织的MDA含量于omin时升至最高，随后开始下降，至7d时仍高于缺血再灌注前水平，第四军医大学硕士学位论文各组与对照组对比差异非常显著(只0.01);而肿瘤组织的MDA含量于1h降至最低，随后有所升高，但至7d时仍明显低于缺血再灌注前水平，各组与对照组比较差异非常显著(只0.01);缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中MDA含量随时间的改变相对比差异非常显著(只0.01)。(5) HE染色结果示:缺血再灌注前，肿瘤组织凋亡细胞率略低于肝脏组织，但缺血再灌注后，肿瘤组织凋亡细胞率迅速增多，变化幅度较大，同一组中肝脏组织和肿瘤组织凋亡细胞率差异非常显著(只0.01 vs.the same group of the livertissue);缺血再灌注后肿瘤组织凋亡细胞率至1d组时达到凋亡峰，随后降低，但到7d组时仍明显高于缺血再灌注前水平，各组与对照组对比均差异非常显著(只0.01);而肝脏组织凋亡细胞也增多，但变化幅度较小，1h组和ld组凋亡细胞较多，除了Omin组外，其他各组与对照组对比，差异非常显著 (只0.01)。(6) TIJNEL实验结果示:缺血再灌注前肝脏组织凋亡细胞数就远低于肿瘤组织(只0.05 vs.the same盯oup of the eaneer tissue)，缺血再灌注后，肝脏组织凋亡细胞数增多，至ld组达到凋亡峰，随后减少，但至7d组基本接近缺血再灌注损伤前水平，恢复较快，1h组、1d组和3d组与对照组相对比均差异非常显著(只0.01);肿瘤组织缺血再灌注前凋亡细胞数就远高于肝脏组织(只0.05 vs.the same group ofthe livertissue)，缺血再灌注后则迅速增多，至ld组达到凋亡峰，随后减少，但至7d组仍高于缺血再灌注前水平，恢复较慢，其中Omin组与对照组对比差异显著(只0.05)，lh组、ld组和3d组与对照组对比则差异非常显著(只0.01);除了1d组外，缺血再灌注后其他各组同一组中肿瘤组织凋亡细胞数明显多于肝脏组织，相差非常显著(只0.01 vs.the same缈up ofthe livertissue)。结论:(1)肿瘤组织缺血再灌注后iNOS含量明显升高，说明