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目的：通过检测ABCG2在四种胰腺癌细胞株中的表达水平,验证ABCG2特异性靶miRNA,并进一步研究靶miRNA在胰腺癌细胞体外增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭和SP细胞中的作用。方法：1.定量PCR和western blot检测四种胰腺癌细胞株BxPC-3,CFPAC-1, PANC-1和SW1990中ABCG2表达情况。2.在线软件预测ABCG2特异性靶miRNA,并体外合成其模拟物,转染PANC-1细胞进行功能验证。3.应用MTT法检测转染后PANC-1细胞增殖情况。4.应用流式细胞仪检测转染后PANC-1细胞周期和凋亡情况。5.应用Transwell小室检测转染后PANC-1细胞迁移和侵袭能力的变化。6.应用流式细胞仪双波长检测转染后PANC-1细胞SP比例变化情况。结果：1.ABCG2蛋白水平和mRNA水平在四种胰腺癌细胞株中均呈不同程度的表达,PANC-1和SW1990细胞呈高表达,BxPC-3口CFPAC-1细胞呈低表达。2.在线软件预测结果显示hsa-miR-520h可能是ABCG2特异性靶miRNA。转染PANC-1细胞hsa-miR-520h模拟物24小时后,ABCG2蛋白水平和mRNA水平均明显下调,这些结果表明,ABCG2的确是hsa-miR-520h的特异性靶基因之一。3.将hsa-miR-520h模拟物转染入PANC-1细胞24小时后,与对照组相比,hsa-miR-520h并没有显著抑制PANC-1细胞体外增殖能力(P>0.05)。4.流式细胞仪检测转染后24小时细胞周期的分布结果显示,与阴性对照组(55.34%)和空白对照组(49.68%)相比,转染hsa-miR-520h组的PANC-1细胞G0/G1期(56.43%)并没有显著增加。流式细胞仪检测转染后24小时细胞凋亡结果表明,与阴性对照组(6.45%)和空白对照组(5.70%)相比,转染hsa-miR-520h组的PANC-1细胞凋亡情况(7.31%)同样无显著意义的增加。5.将hsa-miR-520h模拟物转染入PANC-1细胞24小时后,检测结果显示,与对照组相比,细胞迁移能力下降了55%,侵袭能力下降了53%,这些结果表明,hsa-miR-520h可能是影响PANC-1细胞迁移和侵袭能力的一个潜在的抑制物,而这种作用的发挥可能是通过下调ABCG2表达来实现的。6.流式细胞仪双波长检测PANC-1细胞SP比例结果显示,与阴性对照组(2.79%)和空白对照组(3.06%)相比,转染hsa-miR-520h组PANC-1细胞SP的比例显著减少(1.51%)。这些数据表明,hsa-miR-520h通过下调ABCG2的表达,在SP细胞的鉴定方面发挥着关键性作用。结论：1.ABCG2是hsa-miR-520h的特异性靶基因之一。2. hsa-miR-520h通过下调ABCG2的表达,在胰腺癌PANC-1细胞迁移、侵袭和SP细胞的鉴定方面发挥着重要的作用。3.针对hsa-miR-520h/ABCG2的基因靶向治疗在胰腺癌的治疗中必将具有广阔的、潜在的应用前景。目的：检测ABCG2在胰腺癌组织标本中的表达情况,探讨ABCG2在临床胰腺癌侵袭、转移及预后中的作用价值。方法：1.回顾性分析2006年10月至2010年1月,南京医科大学第一附属医院110例经外科手术切除的病理学证实为胰腺导管腺癌患者的临床资料和肿瘤标本,其中不包括肿瘤广泛转移、不能进行手术切除的胰腺癌病人,以及患有其他胰腺恶性肿瘤的患者。2.免疫组织化学方法检测临床胰腺癌肿瘤标本中ABCG2的表达情况。3. Kaplan-Meier曲线描述胰腺癌患者的生存期,并采用log-rank检验对临床资料和数据进行统计分析4.Cox风险回归模型对胰腺癌预后和各临床参数进行单变量和多变量分析。结果：1.对110例患者的临床资料进行统计,随访结果显示患者生存时间1-38个月不等,其中中位生存期为10个月。2. ABCG2的高表达和病人的年龄、性别、肿瘤的大小、肿瘤的位置没有直接的关系,和肿瘤的UICC分期、T分期、淋巴结转移、神经侵袭和组织学分级密切相关。在组织学分级为G3的35例病例中,有69%的病例高表达ABCG2,组织学分级为G1或G2的73例病例中,仅有15%的病例高表达ABCG2,前者ABCG2高表达比例显著高于后者(P<0.001)3.胰腺癌细胞中高表达ABCG2的肿瘤病人的预后较低表达ABCG2的病人的预后差,高表达ABCG2和低表达ABCG2的肿瘤病人中位生存期具有明显差异,中位生存期分别为5个月和13个月。4.单变量分析结果显示,肿瘤术后的生存期与肿瘤的UICC分期、淋巴结转移、神经侵袭和ABCG2高表达密切相关(P<O.05),与患者的年龄、性别,肿瘤的大小、位置、Grade分级、T分期无关。多变量分析结果显示,肿瘤的UICC分期、淋巴结转移和神经侵袭是胰腺癌预后的独立相关因素,ABCG2高表达不是胰腺癌预后的单独作用因子。结论：1.ABCG2的高表达和病人的年龄、性别、肿瘤的大小、肿瘤的位置无直接关系,和肿瘤的UICC分期、T分期、淋巴结转移、神经侵袭、组织学分级密切相关。2. ABCG2表达水平和胰腺癌的预后密切相关,高表达ABCG2的胰腺癌患者预后较差。3.肿瘤的UICC分期、淋巴结转移和神经侵袭是胰腺癌预后的独立作用因素,ABCG2高表达不是胰腺癌预后的单独作用因子,可能通过促进肿瘤的淋巴结转移和神经侵袭影响胰腺癌的预后。