大乳头水螅再生进程及相关生化与细胞学指标的动态研究

来源 :安徽师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yanyuhan66
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本文主要研究了切割手术前培养温度及切割手术后培养温度对大乳头水螅(Hydra magnipapillata)再生进程的影响,并着重对大乳头水螅再生进程中3种抗氧化酶表达水平的变化、基盘特异性过氧化物酶的表达以及刺细胞的时空分布等进行了探讨。结果表明:1.切割手术前培养温度及切割手术后培养温度对大乳头水螅再生进程具有明显的影响。把在不同温度梯度下(温度范围9℃-30℃,每个温度梯度间隔3℃)培养的水螅通过切割手术得到的水螅前段和后段分别置于不同温度梯度下(温度范围9℃-30℃,每个温度梯度间隔3℃)培养,观察其再生进程。在切割手术前同一培养温度下,随着切割手术后培养温度的升高(9℃除外),水螅再生完成所需时间呈减少趋势;在切割手术后同一培养温度下,随着切割手术前培养温度的升高(27℃和30℃除外),水螅再生完成所需时间同样呈减少的趋势。切割手术前高温梯度下(27℃和30℃)培养的水螅手术后在低温梯度(9℃)下培养,头部和基盘均未再生完成。另外,水螅再生进程中出现了多头和多基盘等异常发育现象。在低温9℃、12℃、15℃下培养的水螅手术后其身体前段于9℃-30℃下再生完成的水螅中有少数个体出现多基盘的异常现象;低温9℃下培养的水螅手术后其身体后段在27℃和30℃下再生完成的水螅中有极少数个体出现双头的异常现象。2.大乳头水螅再生进程中体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)3种抗氧化酶表达水平变化明显。在20℃时水螅头部和基盘在56h内均可完成再生。随着头部再生时间的延长,水螅SOD和CAT活力呈下降趋势,GSH-PX活力呈先下降后上升的趋势;而随着基盘再生时间的延长,水螅SOD和GSH-PX活力呈下降趋势,CAT活力呈上升趋势。水螅头部再生进程中3种抗氧化酶表达水平的变化规律与水螅基盘再生进程中的情况相比存在明显差别,这在一定程度上说明水螅头部再生机制与基盘再生机制之间可能存在一定的差异。3.大乳头水螅基盘再生进程中特异性过氧化物酶仅在基盘周边区域外胚层中表达,而在基盘中央区域(反口孔)外胚层中无表达。通过ABTS细胞化学染色法显示水螅基盘再生20h后其基盘过氧化物酶开始出现少量表达,其后过氧化物酶表达量逐渐增加;基盘再生52h后该酶表达量趋于稳定。水螅基盘再生进程中过氧化物酶的表达量逐渐增加直接反映了基盘再生时细胞分化过程,基盘表达的过氧化物酶可能在维持基盘结构的稳定上起一定的作用。4.水螅的每个刺细胞中含有一个特殊细胞器即刺丝囊,大乳头水螅体内共有穿刺丝囊、钩刺丝囊、卷刺丝囊、粘刺丝囊4种类型的刺丝囊,并且在水螅不同体区的分布存在明显差异。水螅头部再生进程中新生头部和身体后部的刺丝囊的类型和数量均出现较明显的变化。随着头部再生时间的延长,新生头部穿、钩、卷、粘刺丝囊数量不断增多;而身体后部的穿刺丝囊和钩刺丝囊数量变化不明显,但卷刺丝囊和粘刺丝囊数量呈明显减少趋势。新生头部不断增加的刺细胞不仅来自于间细胞的分化,还可能来自于其身体后部刺细胞的转移。
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