MPs对RA患者Th1/Th2失衡的影响

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目的:通过检测RA患者辅助性T细胞产生细胞因子的情况,分析RA患者是否存在Th1/Th2失衡,并探讨患者血浆中微粒(MPs)对Th1/Th2平衡的影响,为研究RA的发病机制提供实验数据。方法:(1)目前尚无Th1与Th2的特异性的细胞表面标志,因此主要以所分泌的细胞因子来区分。IFN-γ为Th1最特异分泌的细胞因子,IL-4为Th2最特异分泌的细胞因子,即Th1:CD4+IFN-γ+,Th2:CD4+IL-4+。采用流式细胞术检测RA患者辅助性T细胞胞内产生的细胞因子IFN-γ和IL-4。采用CBA方法检测T细胞分泌到胞外的细胞因子,包括Th1型(IL-2、IFN-γ和TNF-α)、Th2型(IL-4、IL-6和IL-10)。(2)采用流式细胞术检测外周血中T细胞和单核细胞上Tim-3的表达水平。(3)收集RA患者血浆中MPs,检测MPs对Th1/Th2平衡的影响。结果:(1)RA缓解期患者临床各参数均比活动期患者有所改善(P<0.05);(2)RA患者Th1细胞(CD4+IFN-γ+)比例明显高于对照组(17.5%(2.9-36.6%)vs.33.5%(14.8-54.8%),P<0.05);Th2细胞(CD4+IL-4+)比例两组之间没有显著差异(P>0.05);RA患者Th1/Th2比值明显高于对照组(0.21(0.04-0.96)vs.0.12(0.05-0.25),P<0.05);(3)RA患者血清促进体外培养的PBMC产生Th1型细胞因子(IFN-γ和TNF-α)而抑制Th2型细胞因子(IL-6和IL-10)的分泌,且存在剂量依赖性;(4)RA活动期患者Th1细胞(CD4+IFN-γ+)比例明显高于缓解组(23.5%(13.8-28.5%)vs.7.4%(4.9-8.6%));Th2细胞(CD4+IL-4+)比例也同样高于缓解组(11.5%(9.8-14.5%)vs.5.1%(3.5-6.9%));(5)静息状态下,RA患者外周血单核细胞Tim-3表达水平明显高于对照组(P<0.05),CD4+T细胞Tim-3表达水平在两组之间无明显差异;活化状态下,RA患者CD4+T细胞Tim-3表达水平明显高于对照组(P<0.05);(6)RA患者MPs可调节Th1/Th2平衡,可促进Th2型细胞因子产生,抑制Th1型细胞因子分泌(P<0.05)。结论:(1)RA患者存在Th1/Th2失衡,分泌模式朝Th1偏移,与疾病活动程度存在相关性。(2)RA患者MPs对Th1/Th2失衡具有一定调节作用。
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