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研究目的:冠心平是治疗冠心病、心绞痛具有显著临床疗效的中药复方院内制剂。冠心平由黄精、当归、三七、甘松及瓜蒌皮五味药组成,已在临床上取得良好的疗效。本研究论文以中药谱效关系理论为指导,探究冠心平组方中各味药材不同工艺提取物的体外药效差异,并从指纹图谱中寻找产生活性差异的原因,从而为提示冠心平的药效物质基础和提取工艺优化提供科学依据。研究方法:制备不同工艺(包括水提、醇沉、乙酸乙酯及正丁醇部位)的冠心平药材提取物。对冠心平进行拆方,制备黄精、当归、三七、瓜蒌皮、甘松、冠心平、黄精阴性、当归阴性、三七阴性、瓜蒌皮阴性及甘松阴性的11个组分的水(醇)提、醇沉、乙酸乙酯、正丁醇4个提取部位。基于LC-MS/MS及LCMS-Q-TOF方法,建立冠心平各组分乙酸乙酯及正丁醇提取物的总离子流色谱图。在制备冠心平各组分及其不同提取部位的基础上,进行体外DPPH自由基清除实验,并观察冠心平各组分的不同部位对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用。研究结果:1.在荷质比较小区间内(m/z:200~750),乙酸乙酯的提取物种的成分较多且浓度较大,尤以甘松、瓜蒌皮最为明显;而在荷质比较大区间内(m/z:750~1200),正丁醇提取物的成分较多且浓度较大,尤以三七、当归最为明显。2.以冠心平单味药及复方组分及其四个有效部位为研究对象,进行冠心平组分体外DPPH自由基清除率的比较,并计算其对应的IC50值,以各组分的水(醇)提或醇沉部位IC50值小,其中水(醇)提物中黄精IC50值为:5.659mg/mL,当归IC50值为:3.681mg/mL,三七IC50值为:10.189mg/mL,瓜蒌皮IC50值为:3.762mg/mL,甘松IC50值为:26.843mg/mL,冠心平醇沉IC50值为:6.009mg/mL。3.以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型,采用过氧化氢诱导自由基产生氧化损伤,测定其上清液中丙二醛(MDA)的含量,考察冠心平各组分的不同提取物对HUVEC氧化应激损伤的保护作用,从而评价冠心平各组分对过氧化氢诱导的HUVEC损伤程度的影响。研究结果表明,冠心平各组分对过氧化氢诱导的HUVEC损伤有不同程度的保护作用,其中黄精、当归及冠心平(P<0.01)以水提部位的保护作用最佳,瓜蒌皮、甘松以水提、醇沉部位的保护作用最佳,而三七(P<0.0001)的醇提物保护作用最佳。研究结论:1.冠心平各组分中中药的提取,乙酸乙酯及正丁醇提取物的成分在质和量上均存在着差异:在荷质比较小区间内(m/z:200~750),乙酸乙酯的提取物种的成分较多且浓度较大,尤以甘松、瓜萎皮最为明显;而在荷质比较大区间内(m/z:750~1200),正丁醇提取物的成分较多且浓度较大,尤以三七、当归最为明显。2.冠心平各组分的不同部位浓度与DPPH清除率在一定范围内呈正相关,结果表明冠心平各组分具有良好的清除DPPH氧自由基的作用,整体来说,以各组分的水提及醇沉部位最为突出。同一提取提取方法的不同药物组分对DPPH自由基清除作用有差异。同一药物组分的不同部位对DPPH自由基清除作用有差异。3.冠心平各组分的不同部位对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞的氧化损伤均有保护作用,可明显降低氧化损伤细胞上清液中的MDA含量。按不同部位比较,冠心平阴性各组分的水提和醇沉效果更佳,并以三七阴性、瓜萎皮阴性及甘松阴性最为突出,而冠心平阴性组分的乙酸乙酯及正丁醇部位与冠心平复方之间无明显差异。该体外研究结果表明:冠心平组方中的不同组分应采用不同的工艺进行有效成分的提取,黄精及当归中所含的多糖等大分子物质对于其抗氧化活性具有重要贡献,而瓜蒌皮、甘松、三七中的小分子物质群可能是其药效物质。