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目的:建立溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)的大鼠模型,研究UC大鼠结肠组织中c-fos表达的变化及西帕依溃结安的免疫保护机制;为应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术探讨UC发病的敏感点及维药西帕依溃结安治疗作用靶点,构建大鼠c-fos基因的真核表达载体。方法:健康Wistar大鼠分为正常组(n=10)、溃疡性结肠炎模型组(n=11)、西帕依溃结安干预组(n=14)、5-氨基水杨酸组(阳性对照组,n=14)及生理盐水组(阴性对照组,n=15)共5组,用2、4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB)与乙酸复合法制备大鼠溃疡性结肠炎模型。采用RT-PCR和Western blot的方法检测大鼠结肠组织中c-fos表达的变化;构建pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-c-fos重组质粒,鉴定正确后以Lipofectamine 2000介导,将其导入COS-7细胞,倒置荧光显微镜观察,并用Western blot方法验证其蛋白的表达。结果:模型组大鼠从体征、症状、结肠粘膜损伤情况、病理切片结果均提示已成功建立UC大鼠的模型;c-fos表达在蛋白水平上的半定量结果显示:UC模型组大鼠c-Fos蛋白的表达与正常组相比明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);经治疗后西帕依溃结安干预组大鼠c-Fos蛋白的表达与UC模型组相比明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);生理盐水组大鼠c-Fos蛋白的表达高于西帕依溃结安干预组,差异具有统计学意义(P＜0.05);c-fos表达在mRNA水平上的半定量结果显示组间无统计学意义。经PCR和测序鉴定表明,克隆出大鼠结肠组织c-fos的编码序列同GeneBank收录的序列一致,表明真核表达质粒的构建正确。以脂质体转染COS-7细胞后,用倒置荧光显微镜观察和Western blot检测表明,细胞可表达融合蛋白。结论:c-fos表达的变化可能与UC的发生、发展相关联;维药西帕依溃结安治疗UC的作用可能与其降低了c-fos的表达有关;成功构建并能高效转染COS-7细胞的pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-c-fos重组质粒,为进一步研究UC发病的敏感点及维药西帕依溃结安治疗UC的作用靶点奠定基础。