Exosomes源性microRNA-29c诱导膀胱癌细胞凋亡的研究

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目的:研究膀胱癌细胞分泌的exosomes源性microRNA-29c是否通过下调BCL-2及MCL-1诱导膀胱癌细胞凋亡。材料与方法:免疫组织化学检测28例膀胱癌及其癌旁标本BCL-2,MCL-1的表达。实时荧光定量PCR检测膀胱癌组织及癌旁标本中microRNA-29c的表达。将携带microRNA-29c的腺病毒感染膀胱癌BIU-87细胞,超滤和蔗糖密度梯度法提取膀胱癌源性exosomes。实时荧光定量PCR检测细胞上清液中exosomes中microRNA-29c表达,将带有microRNA-29c的exosomes、空载组及空白组exosomes作用于BIU-87细胞,流式细胞仪检测凋亡结果,RT-PCR及western blot检测BCL-2及MCL-1变化。结果:膀胱癌及癌旁组织中BCL-2表达阳性率分别为60.7%、17.9%(P=0.01),MCL-1为82.1%、10.7%(P<0.01),组间差异有统计学意义;膀胱癌组织中BCL-2与MCL-1表达与microRNA表达呈负相关。经microRNA-29c腺病毒感染的膀胱癌细胞分泌的exosomes中microRNA-29c表达水平为9.97±2.73,空白组及空载组分别为1.00±0.15、1.57±0.35,组间差异有统计学意义(P<0.05);exosomes源性microRNA-29c作用于膀胱癌细胞后凋亡率(27.77±1.30)%明显高于空白(3.47±0.81)%和空载组(1.53±0.25)%,组间差异有统计学意义(P<0.01),同时能降低BCL-2mRNA和蛋白表达及MCL-1蛋白表达。结论:经microRNA-29c腺病毒感染的膀胱癌细胞能通过exosomes运输microRNA-29c,exosomes源性microRNA-29c可通过下调BCL-2及MCL-1蛋白表达,诱导膀胱癌细胞凋亡。
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