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干燥性皮肤瘙痒是很多皮肤疾病的常见症状,尤其老年人更容易出现皮肤瘙痒。研究表明,炎症与瘙痒关系密切,炎症小体在慢性炎症性病,包括炎性皮肤病例如牛皮癣中起重要作用。但是,关于NLRP1炎症小体在干燥性皮肤引起的慢性瘙痒中的作用还不清楚。目的:研究脊髓NLRP1炎症小体在干燥性皮肤诱发的慢性瘙痒中的作用(Chronic itch)及其在慢性瘙痒年龄性别差异中的作用。方法:使用颈背部皮肤涂抹丙酮/二乙醚溶液和水(Acetone ether and water,AEW)的方法制备小鼠干燥性皮肤慢性瘙痒模型;通过视频录像来统计瘙痒行为学;通过蛋白免疫印迹、ELISA试剂盒和实时荧光定量PCR检测各组小鼠炎症小体复合物NLRP1,ASC,Caspase-1蛋白表达和相关炎症因子IL-1β,IL-18,IL-6和TNF-α的含量。使用腺相关病毒构建Nlrp1a-sh RNA-e GFP干扰载体抑制NLRP1炎症小体激活;通过免疫组化方法检测皮肤的损伤程度。结果:1.在AEW处理后的第六天,小鼠出现明显的抓挠行为,表明成功的建立了慢性瘙痒模型。与对照组相比,AEW处理组脊髓组织中NLRP1,ASC和caspase-1的蛋白表达显著增加,其m RNA水平也明显提高。这些数据表明在由AEW引起的慢性瘙痒小鼠中,脊髓NLRP1炎症小体被激活。2.与对照组相比,AEW处理显著增加了脊髓组织中IL-1β,IL-18,IL-6和TNF-α的含量。这些结果表明NLRP1炎性体介导的炎症信号可能与AEW引起的慢性瘙痒有关。3.AAV-Nlrp1a-sh RNA注射4周后,显示出明显的沉默效果。与AEW处理组相比,Control-sh RNA组不影响AEW诱导的抓挠行为。但是,Nlrp1a-sh RNA组明显减少了AEW诱导的自发抓挠的次数。同样,AEW处理导致有核表皮层厚度的显著性增加,Nlrp1a-sh RNA组明显抑制了这种效应。此外,Nlrp1a-sh RNA组阻断了AEW诱导的脊髓组织中ASC,caspase-1,IL-1β和IL-18表达的增加。所有这些结果表明,Nlrp1a沉默阻止了NLRP1炎症小体的组装,并减少了IL-1β和IL-18的释放,抑制了AEW引起的慢性瘙痒。4.与对照组相比,AEW处理组和Control-sh RNA组中TRPV1蛋白表达明显增多,而Nlrp1a-sh RNA组中TRPV1蛋白表达则明显减少。此外,与对照组相比,AEW处理组小鼠抓挠次数明显增加,炎性因子IL-1β,IL-18,IL-6和TNF-α的含量也明显升高;而TRPV1抑制剂CPZ明显抑制这些效应,表明NLRP1炎症小体介导的慢性瘙痒可能与激活TRPV1信号有关。5.与对照组相比,在AEW处理后的第6天,所有青年小鼠和老年小鼠都表现出明显的抓挠行为;而且老年小鼠比青年小鼠表现出更显著的抓挠行为;同时,老年小鼠脊髓组织中NLRP1,ASC和caspase-1的蛋白表达和m RNA水平增加比青年小鼠更为明显。另外,炎症因子IL-1β,IL-18,IL-6和TNF-α含量在老年小鼠中的增加比青年小鼠也更为明显。这些数据表明,NLRP1炎症小体介导的炎症反应与小鼠慢性瘙痒的年龄差异有关。6.与对照组相比,在AEW处理后的第6天,所有雄性和雌性小鼠均表现出明显的抓挠行为,且雌性小鼠比雄性小鼠的抓挠行为更显著;同时,雌性小鼠脊髓组织中NLRP1,ASC和caspase-1的蛋白表达和m RNA水平增加比雄性小鼠更为明显,另外,炎症因子IL-1β,IL-18,IL-6和TNF-α含量在雌性小鼠增加也明显高于雄性小鼠。结论:本研究表明,NLRP1炎症小体介导的炎症信号通过TRPV1通道促进皮肤干燥引起的慢性瘙痒,并在瘙痒传导中起重要作用,并且与慢性瘙痒的年龄和性别差异性有关。因此,抑制NLRP1炎症小体可能为皮肤干燥瘙痒提供一种新的疗法。但是,在未来的研究中,将进一步努力阐明NLRP1炎症小体如何影响瘙痒的信号转导的确切机制。