小秦艽花化学成分与指纹图谱研究

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小秦艽花为龙胆科(Gentianaceae)龙胆属(Gentiana)秦艽组达乌里秦艽(Gentiana dahurica Fisch.)的干燥花,广泛分布于陕西、甘肃、宁夏、内蒙古、新疆、山西、河北等地,多生长于田边、路旁、河滩、水沟边、向阳山坡等地。小秦艽花入蒙药,蒙药名为呼和-朱力根-其木格,具有清热、解毒、止咳、祛痰的功效,主治肺热咳嗽,咽喉热,咽喉肿痛,毒热,瘟热等症。目前,国内外对中药秦艽(以根入药)的研究较多,主要集中于《中国药典》(2015版)规定秦艽基源植物小秦艽(Gentiana dahurica Fisch.)、粗茎秦艽(Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.)、麻花秦艽(Gentiana straminea Maxim.)和大叶秦艽(Gentiana macrophylla Pall.),主要化学成分为环烯醚萜苷类、甾体、三萜类、黄酮类以及苯甲酸类化合物等。但有关小秦艽花化学成分和质量控制的研究还不够深入,因此,本文对小秦艽花进行了系统全面的植化研究,在明确其主要次生代谢产物的前提下,同时对其进行了指纹图谱的研究,为阐明小秦艽花的药效物质基础和建立质量评价方法提供科学依据。  本研究利用常压硅胶柱色谱、D101型大孔吸附树脂、Sephadex LH-20柱色谱、反相ODS、MCI等色谱方法对小秦艽花的乙醇提取物分离得到47个化合物,利用现代波谱技术(UV、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HSQC等)和理化方法鉴定了其中29个化合物的结构,其他化合物正在鉴定中。已鉴定29个化合物中,包括8个三萜类成分:栎瘿酸(1);3β-乙酰氧基-28-羟基-12-烯-齐墩果烷(2);28-羟基-α-香树脂醇(3);28-羟基-β-香树脂醇(4);α-香树脂醇(5);β-香树脂醇(6);熊果酸(7);齐墩果酸(8);11个黄酮类成分:山萘酚(9);柚皮素(10);芹菜素(11);木犀草素(12);(2S)-5,4-二羟基-7-O-β-D-葡萄糖-2,3-二氢黄酮(13);芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14);木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15);木犀草素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(16);芹菜素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(17);芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(18);木犀草素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(19);3个环烯醚萜苷类成分:马钱素(20);獐牙菜苷(21);龙胆苦苷(22);2个甾醇类成分:β-谷甾醇(23);胡萝卜苷(24);4个苯甲酸类成分:没食子酸(25);间羟基苯甲酸(26);2,3-二羟基苯甲酸(27);香草酸(28);1个吡啶类成分:5-羟基-2-羧基吡啶(29);其中除化合物11、16、17、22外其余25个化合物均为首次从小秦艽花中分离得到,化合物2~7、9~10、12~15、18~20、25~29均为首次从该种植物中分离得到。  利用HPLC法首次建立了不同产地的10批次小秦艽花的指纹图谱,共标定了25个共有峰,在化学成分分离鉴定的基础上,指认了其中的11个共有峰,分别为5-羟基-2-羧基吡啶、GD34、GD29、马钱素、间羟基苯甲酸、龙胆苦苷、木犀草素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、獐牙菜苷、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷、芹菜素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷。同时,在以小秦艽花对照指纹图谱为参考的基础上对市售的小秦艽花饮片进行了质量评价,结果表明,药材与饮片之间以及各饮片之间均存在一定差异,这可能与生长环境、地理分布的不同有关。该研究所用的HPLC法操作简单,重现性好,分离度高。建立的指纹图谱全面、有代表性,能客观、真实地反映药材的整体性,为小秦艽花质量评价提供科学的依据,为以后进行药理活性等相关试验提供科学的理论和物质基础。
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