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目的:本研究通过人脐带血干细胞(Umbilical cord blood stem cells, UCBSCs)经尾静脉移植到失代偿期肝硬化SD大鼠体内,采用检测肝功能、肝纤维化指标及病理分级评分等来评价治疗效果,为UCBSCs移植治疗失代偿期肝硬化提供实验依据。方法:应用羟乙基淀粉(Hydroxythyl starch, HES)法从脐带血中分离出单个核细胞(Mononuclear cells, MNCs),包含脐带血CD34+造血干细胞,通过流式细胞仪进行检测。通过腹腔注射四氯化碳(Carbon Tetrachloride, CCl4)加酒精溶液法制备失代偿期肝硬化大鼠模型,以病理检测作为模型成功与否的标准。将模型大鼠随机分为两组:实验组和对照组,每组10只,经检测两组各项指标之间的差异均无统计学差异(P>0.05)。实验组从大鼠尾静脉注射UCBSCs,对照组从大鼠尾静脉注射DMEM/F-12(Dulbecco’s modified Eagle’s medium/F-12, DMEM/F-12),术后两组大鼠均给予腹腔内注射环磷酰胺2mg/100g,连续1周。注射后观察4周,每周分别取血测定肝功能和肝纤维化指标,观察并记录各组大鼠的生存状态及生存时间。4周后,将所有存活大鼠麻醉、解剖,取肝脏组织,标本用100g/L中性甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片,常规苏木精-伊红(Haematoxylin and eosin, HE)和马松(Masson)染色,检测大鼠肝细胞损伤和纤维化情况,并进行病理组织分级评分。结果:1.治疗后,每周一次动态检测,实验组大鼠丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(Aspartateaminotransferase, AST)的含量逐周下降,两组间的差异有统计学意义(P<0.05),而白蛋白(Albumin, Alb)升高及总胆红素(Total bilirubin, TBil)降低,差异无统计学意义(P>0.05);透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)、层粘连蛋白Laminin, LN、胶原蛋白Ⅳ (Collagen type Ⅳ, CⅣ)降低,差异无统计学意义(P>0.05),而前胶原蛋白III(Procollagen type Ⅲ, PCⅢ)降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2.肝脏大体标本观察:实验组肝脏边缘变钝,表面纹理增多,局部可见细小颗粒样突起,无明显结节形成;对照组大鼠肝脏质地较硬,不同程度萎缩变小,颜色灰暗,表面可见大小不等的硬化结节。3.治疗后肝脏切片HE和Masson染色显示:实验组肝脏呈中度纤维化,假小叶的纤维间隔纤细,肝细胞变性及坏死程度较轻,仅见少量脂肪空泡;对照组肝脏标本镜下可见中、重度纤维化,假小叶的纤维间隔粗厚,肝细胞变性及坏死程度重,可见多量脂肪空泡。组织病理学评分表明,实验组较对照组肝细胞坏死及脂肪变程度减轻,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而肝纤维化程度减轻,无统计学差异(P=0.136)。4.治疗后实验组大鼠死亡2只,生存率为80.0%(8/10),对照组大鼠死亡5只,生存率为50.0%(5/10),用Kaplan-Meier进行生存分析,实验组的生存率比对照组高,经Log-rank法检验,两组大鼠生存率差异无统计学意义(P=0.259)。结论:1.应用HES法可从脐带血中提取中分离到MNC,含有足量的UCBSCs,数量达到治疗剂量标准,在免疫标志、生物学特性方面的研究结果符合造血干细胞的特征,可作为造血干细胞的一种细胞来源。2.采用改良型腹腔注射CCl4法制备慢性肝硬化大鼠模型,具有成模稳定性高的优点,符合人肝损伤-肝纤维化的发生和发展过程。3.脐带血造血干细胞具有促进肝细胞损伤的修复,可能减轻肝硬化的作用。