钙果组织培养关键技术的研究

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农大钙果(Prunus humiLis(Bge).Sok)是蔷薇科樱桃属的小灌木植物,是山西农业大学杜俊杰教授从野生欧李中选育出的可供人工栽培的新品系,它是一种抗寒、耐旱、耐盐碱、耐贫瘠,适应性很强的果树。本研究以“农大钙果3号”的茎段为外植体进行组织培养体系的建立,通过随机区组设计,结合方差分析等,着重研究了农大钙果茎段培养的最佳培养基配方及培养程序,以及影响快速繁殖的关键性因素,初步建立了一套较为完整的钙果快速繁殖体系。主要的研究结果如下:1)在一年生植株、两年生植株和成年大树三种植株一级分枝上进行外植体的采集,以一年生植株上采取外植体为最佳选择,污染率为9.62%,而且生命力强,存活率达到93.61%。2)同一植株不同部位上采集到的外植体以中部枝条为最佳,污染率低且有较好的启动效果,污染率为10.87%,存活率为95.24%。3)取材季节以5月份为最佳,此时取材诱导培养效果最好,污染率为10%、褐化率为8.89%、死亡率为6.67%。4)培养条件:昼温25±2℃,夜温23±2℃,光照时间14~16h/D,光照强度1600Lx-2000Lx,pH值为5.8-6.2。5)在启动培养中,培养基MS+6-BA0.05mg/L+IAA0.1mg/L+AC4g/L对农大钙果的启动效果最好,30天后,平均启动率为74.1%。6)侧芽增殖方式的最适培养基为MS+ZT0.3mg/L+IAA0.2mg/L+AC2g/L,30天后其平均增殖系数可达4.45。7)在壮苗培养时采用培养基MS+KT0.1mg/L+NAA0.5mg/L效果较好。30天后,芽生长系数为5.4。8)在生根培养时采用培养基1/2MS+IAA0.7mg/L+蔗糖20g/L生根效果最好。60天后,平均生根率达到70%,生根苗平均根数5.93,平均根长4.03cm。9)在愈伤组织诱导中,在MS+KT0.3mg/L+NAA0.5mg/L的培养基中叶片愈伤组织诱导率达到97.8%;叶片比茎段更适宜作为诱导愈伤组织的外植体,而且形成的愈伤组织致密、色泽正常、表面突起均一。10)愈伤组织分化为芽时,MS+6-BA0.1mg/L+IAA1.5mg/L培养基,暗处理7天的培养效果最好,分化率达到97.2%,平均芽数为3.38。11)炼苗移栽时:基质以腐殖土效果最好,小苗成活率达88%。
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