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哮喘是由多种细胞和细胞组分共同参与的慢性气道炎症，伴有肺功能下降和气流受限。目前主要的治疗措施是消除气道炎症和缓解气道痉挛。在部分哮喘患者的治疗中，即使给予积极的抗炎和舒张支气管治疗后，患者气流阻塞和持续的气道高反应性仍不能被阻止，并出现肺功能急剧下降和激素抵抗。研究显示这种对治疗反应性下降及激素抵抗的主要原因是气道重塑。气道重塑主要表现为哮喘患者气道的病理改变，包括:上皮细胞脱落、粘膜下胶原沉积、平滑肌细胞增生肥厚、肌成纤维细胞增殖及粘液细胞过度分泌、粘液腺增生肥大。近年的众多研究一致认为转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)是哮喘气道重塑中最为关键的致纤维化细胞因子。Smad3蛋白（drosophila mothers against decapentaplegic-3, Smad3）是TGF-β1信号转导通路下游的细胞因子，它促进Ⅰ型胶原的合成和分泌，在哮喘气道重塑中起重要作用。TGF-β1通过TGF-β1/Smad3信号通路起到刺激细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)的合成并抑制其降解从而促进粘膜下胶原沉积，也使其成为目前研究哮喘气道重塑机制的热点之一。近年来RAN干扰（RNA interference, RNAi）技术在基因治疗及功能研究取得很大进展，RNA干扰是通过人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA，与特定的RNA片段结合，引起目的基因的降解，沉默靶基因的表达。目的本实验探讨针对Smad3基因片段的干扰RNA对Smad RNA和蛋白的沉默效果，及其对人肺成纤维细胞（human lung fibroblast-1, HLF-1）合成Ⅰ型胶原的影响。方法设计并合成Smad3特异性小发卡干扰RNA(short hairpin RNAs, shRNA),用脂质体2000（Lipofectamine2000）转染入培养的人HLF-1细胞，反转录聚合酶链反应（reverse transfectionPCR, RT-PCR）法和蛋白质印迹（Westernblot）法观察基因沉默效果，酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunoadsordent assay，ELISA）检测RNA干扰对人HLF-1细胞合成Ⅰ型胶原的影响。结果Smad3-shRNA成功转染入人HLF-1细胞并有效沉默Smad3的表达，RT-PCR结果显示Smad3-shRNA转染后Smad3mRNA表达与正常对照组和阴性对照组比较，分别降低68.2%和69.5%，差异有统计学意义（P<0.05）；Western blot结果显示Smad3-shRNA转染后Smad3蛋白表达与正常对照组和阴性对照组比较，分别降低了67.1%和64.7%，差异有统计学意义（P<0.05）。ELISA检测结果显示Smad3-shRNA转染后Ⅰ型胶原为正常对照组和阴性对照组的59.3%和61.1%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论Smad3-shRNA能有效沉默HLF-1细胞中Smad3mRNA和Smad3蛋白的表达，并减少HLF-1细胞Ⅰ型胶原的合成。为进一步应用干扰RNA技术治疗哮喘患者气道重塑提供新的思路。