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目的：
研究高同型半胱氨酸血症(Hyperhomocysteinemia，HHcy)诱导的大鼠内皮功能不全机制，观察中药复方桃红四物汤对内皮损伤的效应并探讨其机理，为临床治疗动脉粥样硬化等心血管疾病提供靶点和药效依据。
方法：
实验一：雄性SD大鼠20只，随机分为正常组、模型组，每组10只。模型组大鼠给予高蛋氨酸饲料（标准饲料+2％蛋氨酸），正常组给予标准饲料。在第6周和第9周，眼眶采血，并每组随机处死2只大鼠，收集腹主动脉和血清。采用酶联免疫吸附法检测血清同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)浓度，用生化及酶联免疫吸附检测血清NO、ET-1、PGF1α、TXB2、MDA、SOD、TNF-α、MCP-1浓度，应用HE染色、免疫组化观察主动脉组织病理改变和内皮细胞凋亡情况。并用RT-PCR检测eNOS、tPA、PAI-1、TNF-α、Fas的mRNA表达，westernblot检测eNOS和PAI-1蛋白表达水平。
实验二：雄性SD大鼠24只，随机分为正常组、模型组、桃红组、叶酸组，每组6只。模型组、桃红组、叶酸组大鼠给予高蛋氨酸饲料（标准饲料+2%蛋氨酸），正常组给予标准饲料。同时，桃红组给予桃红四物汤水煎剂(4.59g生药·Kg-1·d-1)灌胃，叶酸组给予叶酸混悬液(1.35mg·Kg-1·d-1)灌胃，正常组、模型组予蒸馏水2ml代替灌胃，每日一次，持续12周，处死取动脉组织冻存。采用酶联免疫吸附法检测血清同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)浓度，用生化及酶联免疫吸附检测血清NO、ET-1、PGF1α、TXB2、MDA、SOD、TNF-α、MCP-1浓度，应用HE染色、免疫组化观察主动脉组织病理改变和内皮细胞凋亡情况。并用RT-PCR检测eNOS、tPA、PAI-1、TNF-α、Fas的mRNA表达，western blot检测eNOS和PAI-1蛋白表达水平。
结果：
1.与正常组相比，在第6周、9周和12周，模型组血清Hcy较同一时间点正常组升高，但血Hcy浓度无时间依赖的升高趋势。12周时，病理学提示：模型组内膜欠光滑，内皮细胞部分剥脱，内皮下间质细胞胞浆疏松，中膜增厚，部分血管平滑肌细胞排列紊乱，部分血管平滑肌细胞胞浆呈Cleaved Caspase3黄褐色阳性染色。12周时，血ET-1、TXB2、MDA、TNF-α浓度升高，血MCP-1有升高趋势；血NO、PGF-1α、SOD水平降低。主动脉eNOS在基因、蛋白表达水平有时间依赖性降低趋势，PAI-1在基因和蛋白表达水平均呈时间依赖性升高，血管Fas、TNF-αmRNA表达水平随时间逐渐上调。
2.实验12周后，检测正常组、模型组、桃红组合叶酸组的各指标如下：
Hcy浓度：与正常组相比较，模型组血Hcy浓度升高，与模型组相比，叶酸组血Hcy浓度降低。
组织病理改变：HE染色、CD31免疫组化显示模型组内皮细胞部分剥脱，内皮下间质细胞胞浆疏松，血管中膜层增厚，血管平滑肌层层数增多，部分排列不整齐，Cleaved Caspase3免疫组化可见片状血管平滑肌细胞胞浆黄褐色阳性染色；桃红组和叶酸组内皮较完整，内皮下间质细胞胞浆疏松，血管中膜增厚程度轻于模型组。未见Cleaved Caspase3片状阳性染色。
内皮舒缩功能调节因素：相对于正常组，模型组血清NO浓度降低，主动脉组织eNOS基因和蛋白表达水平下降，血清ET-1浓度升高；与模型组相比较，桃红组、叶酸组的药物干预均能使NO浓度和eNOS表达下调，血清ET-1浓度升高，且桃红四物汤效果要优于叶酸。
内皮抗血栓形成因素：相对于正常组，模型组血浆PGF1α浓度降低、TXB2浓度升高；相对于模型组，桃红组PGF1α浓度显著升高，TXB2浓度均显著降低。
纤溶系统：主动脉组织tPA表达在各组间均无差异。与正常组比较，模型组主动脉PAI-1基因和蛋白表达均显著上调；而相对于模型组，桃红组主动脉PAI-1基因和蛋白表达明显下调。
炎症与凋亡相关因素：与正常组相比较，模型组大鼠血清TNF-α浓度升高，血清MCP-1浓度有升高趋势；相对于模型组，桃红组血清TNF-α浓度降低。与正常组相比，模型组大鼠主动脉TNF-α、Fas mRNA表达上调；与模型组比较，桃红组主动脉TNF-αmRNA表达明显下调，Fas mRNA表达有下调趋势。
氧化应激因素：与正常组大鼠比较，模型组MDA浓度升高；与模型组相比，桃红组血清MDA浓度有降低趋势。与正常组大鼠比较，模型组血清SOD浓度降低，与模型组相比，桃红组血清SOD无显著差异。
结论：
1、高同型半胱氨酸血症可以诱导大鼠动脉内皮功能不全，其机制包括：使血管发生病理改变，损伤内皮的舒缩功能、抗血栓形成功能，使纤溶活性下降，并上调死亡受体和配体的表达。
2、桃红四物汤能拮抗高同型半胱氨酸血症诱导的大鼠内皮功能不全，主要通过减轻血管病理学改变，改善内皮的舒缩功能、抗血栓功能，增强纤溶活性，下调死亡受体和配体的表达。