四逆散是最著名的方剂之一，临床应用范围相当广泛，最早见于东汉张仲景所著《伤寒论》，此方由柴胡、枳实、芍药、炙甘草组成，是疏肝解郁，调和肝脾的祖方，四逆散中包含柴胡和芍药，柴胡和枳实，枳实和甘草这三个药对，原方稍作加减即可作为其他方剂而被广泛的应用于包括炎症性疾病在内的很多慢性疾病的治疗，因此，具有很高的研究和实用价值，现代常用于治疗慢性肝炎、胆囊炎、胆石症、胆道蛔虫病、胰腺炎、急性胃炎、急性阑尾炎、肋间神经痛等属于肝郁脾滞的治疗。同时，由于古今文化的差异，四逆散同其他中医方剂一样，其使用往往难以理解和操作，这也就限制了其应用，虽然中药复方活性成分的研究思路及手段已经逐步提高和改进，但其成分在复方中的作用还往往无法认定。在本研究中，我们尝试使用从四逆散中选择性剔除柚皮苷，并考察剔除这一成分对全方改善炎症性肠炎的影响。　　本论文的第一章研究了四逆散全方、方中中药枳实的主要活性成分柚皮苷以及四逆散选择性剔除柚皮苷样品三者对三硝基苯磺酸导致的小鼠结肠炎的影响。实验结果显示，四逆散可改善肠炎导致的腹泻和体重下降，可不同程度的改善动物的死亡率，同时降低结肠组织炎症病变严重程度。柚皮苷及柚皮苷剔除样品只有在高剂量时对结肠炎一定的治疗作用。此外还检测了评价药物对结肠炎影响的常用指标如:MPO，TNF-α，IFN-γ，IL-10和IL-12。我们的实验结果表明:柚皮苷对结肠炎的治疗效果微弱，而四逆散的治疗效果比较显著，但是四逆散选择性剔除柚皮苷后的样品对肠炎的改善效果大大削弱。这说明了柚皮苷在四逆散治疗炎症性肠炎的过程中与四逆散其他的组分之间具有协同作用。　　柚皮素是柚皮苷在体内的代谢产物，也是柚皮苷发挥作用的主要活性成分，在第一章中，柚皮苷单独作用，对炎症性肠炎的治疗效果不佳，可能是由于柚皮素的生物利用率低，而在四逆散中，由于柚皮素能与其他成分发生协同作用，故能在比较低的浓度下发挥重要的作用。但其中具体的协同机制我们暂时没有进行深入的研究，我们将在以后的研究中进一步讨论。　　在我们观察到柚皮苷在四逆散中对炎症性肠炎的治疗效果后，我们接下去着重研究柚皮素对小鼠T淋巴细胞功能的影响。在许多炎症（如炎症性肠炎，迟发型超敏反应等）的发病过程中T细胞扮演了极为重要的角色，为了阐述柚皮苷在四逆散改善炎症的过程中可能承担的作用，我们考察了柚皮素对T细胞增殖的影响，实验结果显示，对于anti-CD3和anti-CD28抗体引起的小鼠淋巴细胞的增殖，柚皮素均表现出显著的抑制效果，且其抑制效果呈良好量效依赖性关系。在我们的研究中发现，柚皮素能够抑制T细胞的活化并且促进活化的T淋巴细胞发生凋亡，而对正常的T淋巴细胞没有影响。柚皮素能够显著的影响PARP以及cleaved-caspase3的表达。PARP是细胞凋亡的标志分子，caspase3是细胞发生线粒体凋亡的关键分子，cleaved-caspase3是其活化形式。我们的结果表明，柚皮素在活化的T淋巴细胞中上调PARP以及cleaved-caspase3从而影响细胞的凋亡。此外，为了深入的阐述柚皮苷的作用机制，我们还研究了Akt通路和Bcl-2家族蛋白在柚皮素促凋亡过程中的作用。Akt信号通路具有抵抗凋亡的作用，能够促进细胞的增殖和存活。 Bcl-2家族蛋白中，Bax和Bad具有促凋亡作用，而Bcl-2作用相反。我们的结果显示，柚皮素能够明显的减少Akt通路以及Bcl-2蛋白的表达，而增加Bax和Bad蛋白的表达。　　综上所述，四逆散对炎症性肠炎具有明显的治疗作用，我们研究显示柚皮苷单体虽然对炎症性肠炎的治疗效果并不显著，但是其在四逆散治疗炎症性肠炎中占据了重要的作用，是发挥作用的主要成分之一。柚皮苷在四逆散全方中发挥的治疗作用特点在于，抑制了T细胞的活化，能够促进活化T细胞的凋亡。　　在本论文中我们使用的成分剔除这一独特的研究思维是中药方剂研究中的重要创新和补充，可为方剂研究提供新的途径。