珠蛋白提取、ACE抑制肽的酶法制备及酶动力学的研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wskfdftg
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
我国人民的肉食主要以猪肉为主,然而,大多数肉类屠宰场中猪血利用率极低,猪血球基本上被废弃。血红蛋白是猪血中的重要成分,含铁量极其丰富。由血红蛋白提取的珠蛋白是一种非常优良的蛋白质。由蛋白酶水解珠蛋白而获得的多肽对血管紧张素工转换酶(ACE)具有很高的抑制作用。本文通过对对珠蛋白提取的试验,确定了抗凝剂的选取为0.3%的柠檬酸三钠;确定4倍丙酮和2%NaAc添加量为珠蛋白与血红素提取的最优参数;此时珠蛋白收率为29.03g(每升新鲜猪血得珠蛋白的克数)。利用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的单酶和双酶水解珠蛋白,进行珠蛋白的酶解试验,反应时间、加酶量、底物浓度、温度和pH值等因素均对酶解液水解度产生影响。四种蛋白酶单酶及双酶水解多肽对水解度和ACE的抑制活性有不同程度的影响,通过TCA法和RP—HLPC法对水解液进行水解度和ACE抑制活性测定,单酶水解中以胃蛋白酶水解液的ACE抑制率最大,为94.63%;碱性蛋白酶水解液的ACE抑制率最高为94.49%,水解度为14.42%。双酶水解试验中,胃蛋白酶与碱性蛋白酶组合的水解物的ACE抑制活性最高,达94.82%,且时间较单酶水解短,水解效率提高。在酶促反应动力学(kinetics of enzyme-catalyzed reactions)实验中利用Lineweaver-Burk方法,分别以动物蛋白——珠蛋白为底物,求出Km和Vmax,以期找出酶的最优反应条件。pH 2.5时,胃蛋白酶的Vmax值达到最大值,为0.190mg/ml·min,Km值较低小,此时酶分子对底物的亲和力较大;碱性蛋白酶在50℃时Km值达到最小值为13.00 mg/ml,Vmax为0.142 mg/ml·min;木瓜蛋白酶的动力学试验的结果均较胃蛋白酶和碱性蛋白酶的效果差。胃蛋白酶和碱性蛋白酶的组合酶解珠蛋白效果较佳,Vmax,Km分别为0.237mg/ml·min和6.916 mg/ml。
其他文献
鹤山雅图仕印刷有限公司(以下简称雅图仕)创立于1991年,是利奥纸品集团(香港)有限公司旗下独资经营的大型现代化印刷企业。经过多年稳健发展,已建立了完善的印前、印刷和印后生产体
报纸
<正>中华文化是地球上最古老的文化之一,经历了长达五千多年不间断的发展过程。岁月无情,在世界上曾经灿烂一时的一些其他古代文化,如古巴比伦文化、古希腊文化、古埃及文化
武关道是唐代交通线路中沟通南北、辐射东西的重要地域结点,因其所处的特定地理位置,承载了深厚的历史记忆与丰富的文化内涵,亦赋予唐人诗文创作特定的历史文化意蕴。本文分
一个人的思维方式会决定他的行为及情绪,小学儿童的思维形式在这个阶段从具体形象过渡到抽象逻辑,且五、六年级学生已经初步具备了辩证思维能力。但孤儿群体在幼年所经历的特殊的、重大的生活事件会对他们的解释风格产生巨大的影响,尤其会对一些不好的事做永久的、普遍的、内在的解释。本研究充分结合小学儿童思维发展的特点,通过对小学六年级孤儿进行团体辅导,促使他们在关键时期形成正确、理性的乐观解释风格。本研究采用的问
随着市场经济的不断发展与深化,企业间的竞争不断加剧。市场环境的变化迫使企业转变经营方式,赊销方式开始成为企业广泛使用的销售手段。随着赊销的大量普及,市场上出现了很
研究目的:探究Abbe瓣存活情况与术后Abbe瓣关键护理观察指标的相关性。研究方法:选取2017年7月-8月期间收治的13名上唇缺损患者为研究对象,通过根据对Abbe瓣的颜色、毛细血管
变应性接触性皮炎(Allergic contact dermatitis,ACD)是皮肤或黏膜接触致敏物后主要由T细胞介导的迟发型变态反应引起的炎症性皮肽病,包括来源于T细胞等的多种细胞因子、趋化
中职英语教育的主体目标是充分提升中职生在英语方面的听说水平,但一直以来,由于中职英语授课“轻听说,重读写”的现象比较严重;加上班级的人数较多,想做到每堂课上每个人都
目的分析儿童保健中开展早期综合发展指导对小儿发育的影响。方法随机选取行健康体检的婴幼儿300例作为本次研究的对象,将其分为对照组和观察组,各150例。对照组实施常规保健
随着城市建设的不断发展,城市在不断完善基础功能的同时也在不断追求着更舒适更高品质的生活环境。规划更整洁的街道,更舒适的城市公共空间,以及更高品质的夜景景观,都在丰富