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临床上,细小病毒和乙型脑炎病毒或者两者合并感染所致的生产母猪繁殖障碍性疾病,可引起妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊胎、畸形胎、弱仔和公猪不育症等,对养猪业的持续性发展造成很大的损害。细小病毒VP2蛋白和乙型脑炎病毒E蛋白作为病毒粒子的主要结构蛋白,被证实且有良好的免疫原性,可以诱发机体免疫反应,产生相应的抗体。IFN-a作为机体重要的细胞活性因子之一,在抗病毒、抗肿瘤细胞增殖以及免疫活性调节等多方面发挥重要功效。本实验将扩增得到的猪IFN-a基因产物克隆到pMD19-T Simple载体上,得到了重组质粒pMD-IFNa。再将IFN-a目的基因片段通过NheⅠ、KpnⅠ双酶切插入到已融合VP2和E基因主要抗原表位的真核载体PcDNA3.1-E-VP2中,得到重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2。然后将重组质粒DNA免疫健康小鼠,并设立PcDNA3.1-E-VP2、PcDNA3.1-E-VP2和pMD-IFNa同免及生理盐水3个对照组。免疫后定期断尾采血并检测血中T淋巴细胞亚群数量的动态变化,以及血清中PPV、JEV抗体水平的变化。结果表明：重组质粒DNA免疫小白鼠后,CD3+、CD4+T淋巴细胞在外周血淋巴细胞中的比率均有一定程度的升高；而CD8+T淋巴细胞在免疫后7-14d时有所下降,之后再升高。同时,从小鼠血清中检测出较高水平的PPV、JEV特异性抗体。这说明,重组IFN-a基因后所得的PcDNA3.1-IFNa-E-VP2质粒DNA具有良好的免疫原性,IFN-a有一定的免疫增强和辅助作用,重组质粒DNA有用作新型PPV-JEV二联基因工程疫苗的潜力。