【摘 要】
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Onconase(ONC)是一种在两栖类蛙(Rana Pipiens)卵细胞内存在的核糖核酸酶，是RNaseA超家族中的一员。研究证实其具有很好的抗肿瘤效果，目前已经进入三期临床实验。本文主要是通
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Onconase(ONC)是一种在两栖类蛙(Rana Pipiens)卵细胞内存在的核糖核酸酶，是RNaseA超家族中的一员。研究证实其具有很好的抗肿瘤效果，目前已经进入三期临床实验。本文主要是通过基因工程的方法，利用pET22b(+)表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中表达Onconase。通过包涵体复性、蛋白纯化等程序最终获得了与天然蛋白活性相似的重组蛋白，并检测了ONC对源于皮肤T细胞淋巴瘤的Hut-78、慢性骨髓白血病肿瘤细胞K562的毒性(Hut-78IC50=0.5μM，K562IC50=1μM，为进一步将该蛋白应用于肿瘤体内治疗试验作出准备。
同时，本实验室还制备了Onconase的两种靶向性蛋白：ONC-Tf和ONC-IL2。前者采用化学偶联方法，后者采用基因工程融合蛋白表达的方法，希望获得有毒性的复合物，为下一步进行肿瘤靶向治疗实验做准备，目前这两项工作还在进行之中。
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