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目的 探讨洋金花总碱在转化生长因子-β1(TGF-β1)体外诱导的人肺腺癌细胞A549细胞间充质化过程中的作用。方法 将体外培养的A549细胞随机分成3组,正常对照组,TGF-β1组及药物组。正常对照组不加入TGF-β1;TGF-β1组加入5 ng/mL TGF-β1;药物组又分为低浓度组(50ug/ml)、中浓度组(100ug/ml)和高浓度组(200ug/ml)(浓度由前期实验MTTT法法得出),分别在各组中加5 ng/mL TGF-β1和相应的药物浓度,干预24小时后倒置显微镜下观察细胞形态学变化,分别作用24小时,48小时,72小时后,通过Western-Blot及RT-PCR检测各组A549细胞上皮标志物CK-19及间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白和基因表达的变化。结果 1.倒置相差显微镜下观察,在5 ng/mL TGF-β1的诱导下,细胞形态由对照组的鹅卵石状逐渐转变为梭形,类似于纤维母细胞,细胞之间的连接变得松散,TGF-β1诱导A549细胞向间质细胞形态转化。2.Western-blot显示:正常对照组有CK-19表达及微量的α-SMA表达;TGF-β1组CK-19表达明显下调,α-SMA表达上调,与对照组相比(P<0.01),差异有统计学意义;予洋金花总碱干预后,药物组与TGF-β1组比较,CK-19的表达上调(P<0.01),但仍低于空白对照组(P<0.01);α-SMA表达有所抑制(P<0.01);其差异与作用时间及药物浓度呈正相关,在72小时及药物浓度为200ug/ml时差异最为明显。3.RT-PCR显示:TGF-β1组与正常对照组相比,CK-19mRNA表达下降,α-SMA mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与药物组相比,三个药物组的CK-19 mRNA表达均高于TGF-β1组(P<0.01),α-SMA mRNA表达均低于TGF-β1组(P<0.01)。3个作用时间点之间相比,药物组CK-19mRNA的表达逐渐增多(P<0.01),α-SMA mRNA的表达无明显差异(p>0.05)。结论 1.TGF-β1可以诱导A549细胞发生上皮间质转化,细胞形态由鹅卵石状向梭形改变,洋金花总碱干预后在形态上不能完全逆转。2.洋金花总碱在蛋白水平能抑制α-SMA表达,增加上皮细胞标志物CK-19的表达,且呈时间依赖性和浓度依赖性,在72小时及200ug/ml浓度时效果最为明显。3.洋金花总碱在基因水平能增加CK-19mRNA的表达,减少α-SMA mRNA的表达。4.洋金花总碱在TGF-β1诱导A549细胞EMT过程中能抑制α-SMA表达,增加CK-19的表达,但能否通过EMT来抗肺纤维化,有待进一步深入研究。