埃博拉病毒(Ebola virus，EBOV)是丝状病毒科单股负链RNA病毒，包括苏丹型埃博拉(Sudan ebola)、扎伊尔型埃博拉(Zaire ebola)、科特迪瓦型埃博拉(Cote dIvoire ebola)、本迪布焦型埃博拉病毒(Bundibugyo ebola)、雷斯顿型埃博拉(Reston ebola)等5种亚型。埃博拉病毒一般通过感染者的血液、体液和分泌液等传播，能够引发脊椎动物特别是灵长类动物产生出血热症状，人感染病例的死亡率高达90％以上。但到目前还没有有效预防和治疗埃博拉病毒感染的药物和疫苗，被WHO列为对人类危害最严重的4级病毒和潜在的生物战剂。作为一个进出口贸易和劳务输出频繁的国家，这种烈性病毒通过边境口岸和人员交流输入我国的可能性正不断加大，给我国公共卫生应急体系和非传统国家安全带来新的挑战，因此开展埃博拉博病毒疫苗的研制具有十分重要的意义。　　重组病毒疫苗能在体外大量制备，进入人体后接近于自然感染，能够诱导强烈的系统免疫应答和粘膜免疫反应，被认为是一种具有应用前景的疫苗。我们选择黄热病毒疫苗株(Yellow Fever17D)作为重组病毒疫苗载体，构建了YF17D-edited GP，并检测edited GP的表达，测定重组病毒的生物学特性，在小鼠模型上进行免疫学研究。　　为了研究埃博拉病毒免疫性最强的GP蛋白的表达情况，我们构建了GP1(33-313)、GP1(190-313)、GP2(502-632)和sGP的原核表达载体(pET28a(+))和GP全长、GP和GP2的真核表达载体(pcDNA3.1(+))，结果表明GP1(33-313)、 GP1(190-313)和sGP能在Escherchiacoli BL21(DE3)以包涵体的形式表达，而GP2(502-632)不表达，而编辑后的GP全长、GP1和GP2在能293T（人胚胎肾细胞系）细胞中实现真核表达，而不能在BHK21（幼仓鼠肾细胞）中表达。　　为了构建重组病毒，我们将修饰过的埃博拉GP插入到YF17D的E和NS1之间。经鉴定，重组病毒能在BHK21中出毒，病毒滴度达106 PFU/ml。通过噬斑测定、WB(western杂交)、IFA（间接免疫荧光）和RT-PCR等方法分别检测到埃博拉GP蛋白的表达，发现重组病毒的滴度小于YF17D的毒力滴度，说明了重组病毒的安全性。遗传稳定性试验证明重组病毒YF17D-edited GP插入的外源基因在重组病毒传至6代后丢失，可能与融合区序列与YF17D同源性较高和插入基因过大有关。小鼠免疫试验证明，YF17D-edited GP重组病毒能够在小鼠体内诱导出针对GP特异性的结合抗体，并特异性地介导CD8+T淋巴细胞分泌IFN-γ、 IL-2等细胞分子，参与特异性抗病毒细胞免疫。　　此项研究为基于安全病毒骨架设计重组疫苗提供了一定的线索，也为进一步阐释重组病毒诱导机体产生特异性免疫反应机理提供了依据。