【摘 要】
：
目的:皮诺敛酸（PLA）具有减肥、降脂、抗氧化等多种药理作用。PLA对动脉粥样硬化（AS）等心血管相关疾病有较好的疗效,但PLA改善AS作用机制较为复杂,尚未阐明。本研究基于代谢组学探讨PLA对过氧化氢（H2O2）诱导的人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）损伤的保护作用及分子机制。方法:1.利用实时无标记动态细胞分析技术（RTCA）测定HCAEC细胞增殖曲线以判定最佳的细胞接种密度;检测PLA对HCA
论文部分内容阅读
目的:皮诺敛酸（PLA）具有减肥、降脂、抗氧化等多种药理作用。PLA对动脉粥样硬化（AS）等心血管相关疾病有较好的疗效,但PLA改善AS作用机制较为复杂,尚未阐明。本研究基于代谢组学探讨PLA对过氧化氢（H2O2）诱导的人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）损伤的保护作用及分子机制。方法:1.利用实时无标记动态细胞分析技术（RTCA）测定HCAEC细胞增殖曲线以判定最佳的细胞接种密度;检测PLA对HCAEC细胞的毒性作用;筛选合适的H2O2造模浓度与时间;筛选合适的PLA治疗剂量与时间以确定分组情况;利用RTCA绘制HCAEC细胞生长曲线;利用显微镜观察细胞形态;流式细胞术检测细胞凋亡;利用试剂盒检测细胞的抗氧化能力;通过ELISA法检测细胞上清液一氧化氮（NO）含量;利用Western blot法检测细胞内内皮素1（ET-1）、核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路蛋白表达。2.通过代谢组学筛选候选差异代谢物;通过富集分析和拓扑分析对差异代谢物进行进一步的代谢通路分析。3.检测细胞内总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、三磷酸腺苷（ATP）含量;利用分子模拟技术观察PLA与3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMG-Co A还原酶,HMGCR）、脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）的对接情况;利用Western blot法检测细胞内HMGCR、ATGL、固醇调节元件结合蛋白-1（SREBP1）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）、肉碱棕榈酰转移酶1A（CPT1A）蛋白的表达。结果:1.最优的细胞密度为5×10~4cells/m L;PLA的安全性较好,0-1000μM的PLA对HCAEC细胞存活率几乎没有影响;选定400μM的H2O2造模12 h为最优的造模浓度;选用5μM PLA为低剂量组（PLAL）、10μM PLA为中剂量组（PLAM）,20μM PLA为高剂量组（PLAH）进行进一步的研究;细胞生长曲线结果表明,PLA能够促进HCAEC细胞活力,升高细胞指数（CI值）;PLA能够改善HCAEC细胞形态;PLA可降低H2O2诱导的HCAEC细胞的凋亡;PLA可通过增加内皮舒张因子NO的分泌,降低ET-1表达,改善内皮细胞功能障碍,减轻H2O2诱导的HCAEC的损伤;PLA可以降低H2O2诱导的HCAEC细胞内活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量,升高谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力,减轻氧化应激损伤,降低脂质过氧化,从而减轻H2O2诱导的HCAEC的损伤;PLA可通过降低细胞内Keleh样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）蛋白,升高Nrf2、ARE、血红素氧合酶1（HO-1）蛋白,减弱H2O2诱导的HCAEC细胞的氧化应激损伤。2.通过代谢组学确定了8种候选生物标志物,其中油酸、亚油酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸等均为脂肪酸相关内源性代谢产物。经过信号通路预测发现,这些内源性代谢产物主要参与亚油酸代谢、花生四烯酸代谢等脂肪酸代谢以及能量代谢信号通路。3.PLA可降低H2O2诱导的HCAEC细胞内TC、TG、FFA堆积以及增加ATP生成,调节脂质代谢,减少脂质堆积;PLA与HMGCR、ATGL分子对接吻合度较好,PLA与HMGCR和ATGL对接最佳抑制常数（Ki）分别为4.89 mmol/L与2.97 mmol/L;PLA可降低H2O2诱导的HCAEC细胞内HMGCR、SREBP1、ACC蛋白的表达、升高ATGL、PPARα、CPT1A蛋白的表达,从而降低细胞内TC、TG、FFA堆积、升高ATP含量,保护H2O2诱导的HCAEC细胞损伤。结论:PLA可能通过调节Nrf2/ARE和脂肪酸代谢通路,降低氧化应激损伤和凋亡,改善脂质代谢,调节内皮细胞功能障碍,从而保护H2O2诱导的HCAEC损伤。
其他文献
渎职犯罪与贪污贿赂犯罪同属于职务犯罪，但渎职犯罪并没有引起足够的关注。目前渎职犯罪缓刑适用过多，可能影响人民群众对司法公正的信赖。只有正确认定渎职犯罪的规范构造才能正确量刑。基于刑法教义学，否定将主观方面的差异作为区分滥用职权罪与玩忽职守罪的标准，重新认定滥用职权罪的罪过形态和主观徇私的地位，并进一步对渎职行为和重大损失结果进行规范认定，进而推出行为类型的差异，才能得出滥用职权罪与玩忽职守罪的界定
遵循过程-格局-机理的脉络，结合每日新增病例、累计确诊病例、治愈量、死亡量等分析俄罗斯新冠肺炎疫情的发展过程，利用空间自相关分析研究俄新冠肺炎疫情的格局变化，基于多元线性回归分析探讨俄新冠肺炎疫情扩散的影响因素。研究发现：自2020年1月31日俄罗斯出现首例确诊病例以来，俄新冠肺炎疫情经历了平稳偶发、迅速暴发和扩散、扩散衰退、严重扩散等4个阶段，其治愈量保持稳定上升态势，死亡率徘徊于2%。人口规模
建筑结构内的气体爆炸灾害是工业生产中最常见的事故之一。将气体爆炸灾害作为随机事件，以人员死亡概率为衡量标准，通过考虑事故发生概率、爆炸荷载分布与人员伤亡的不确定性，提出了评估爆炸灾害的风险评估模型。该模型通过描述气体浓度、点火能、荷载分布等参数的概率分布方程，定量得到不同工况下气体爆炸灾害的人员死亡概率，以此对爆炸灾害进行风险评估。以某一实际工况为例，利用此模型分析比较了不同泄放面积与可燃气体对人
大数据时代的发展推动了社会经济的快速前进，也为大众的生活提供了更多的便利。在新历史机遇发展下，国内城市规划已经形成了新挑战，城市规划是对于城乡空间进行整体的协调，使人们居住环境更加舒适，区域经济能够协调发展。大数据时代的到来，传统型城乡规划已经转变为新型模式，将地区智慧城市规划建设作为重点内容。在社会的发展趋势下，城市化建设开始向着生态化、低碳化发展趋势。与此同时，信息的合理应用推动城市交通的环境
＜正＞引言2021年7月,中共中央办公厅、国务院办公厅印发了《关于进一步减轻义务教育阶段学生作业负担和校外培训负担的意见》,提出“双减”即减轻义务教育阶段学生作业负担、减轻校外培训负担。“双减”作为英语教育界重要指导方向,从各个层面影响了英语教学,其中亦包括初中英语作业设计。如何优化设计以及落实理论指导于教学实践,教育园丁们纷纷努力探索,发挥作业在教学中的重要角色。本文结合“双减”背景下的理论指导
“双减”政策秉持学生中心理念，遵循减负增效的原则，力求进一步减轻义务教育阶段学生压力。在这一政策下，立足初中英语作业设计现状，结合作业设计原则，进一步探讨作业优化设计策略。这要求教师以人为本，立足学生实际，把握整体、适度、差异及科学性的原则，从内容、形式、内涵、评价等方面进行作业设计创新，以期促进和谐发展，提升教育质量。
目前，对于刑事辩护，律师行使辩护权的过程中面临着立法不完善、不健全以及律师具有风险压力大等情况发生，增加了律师在刑事辩护中的困难程度，尤其是在职务犯罪调查的程序中，如何正确看待律师执业过程面临的各种困境，并从现实的角度中寻找解决困境的方案，在当前刑事辩护中具有非常重要的意义。本文首先对职务犯罪的相关概述进行简述，叙述职务犯罪调查程序中律师刑事辩护的困境，并进行实际的分析，尽可能解决律师行使辩护权所
通过非靶向代谢组学技术研究白及多糖（Bletilla striata polysaccharide， BSP）对5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）化疗的荷瘤小鼠血清中内源性代谢物的影响，探讨BSP改善5-FU引起的机体毒副反应的作用机制。将雄性BALB/C小鼠随机分为正常组、模型组、5-FU组和5-FU+BSP组，每组8只。除正常组外，其余各组均通过皮下接种CT26小鼠结肠癌细
随着科学技术的发展，信息技术和人工智能已经诞生并在人们的生活中发挥着越来越重要的作用，而教师为了提升学生的综合能力，让学生能够跟上时代的发展，也开始注重起对学生的信息技术教学。而随着教育体制的改革，其提出要将人工智能教育融入小学信息技术课堂当中，进而让小学生从小养成对先进技术探索的习惯，以促进小学生的全面发展。本文就如何将小学信息技术课程与人工智能教育进行融合进行了相关分析，以期为小学信息技术教师
“居民、出行特征、设施点”三要素构成了生活圈模式。生活圈模式在实践应用中，往往容易忽略三要素的差异性，导致公共服务设施供需不匹配，从而引发“生活圈不生活”的现象。尤其在小城市中，照搬大城市社区生活圈模式对分析不同居民出行特征与设施点之间的关系存在局限。文章基于云南省普洱市生活圈三要素，通过采集居民满意度问卷数据、城市体检数据和开源大数据进行分析。研究发现：小城市社区生活圈中公服设施布局指标量化结果