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大黄在中药组方中应用范围较广，除临床日常用药外，多数降脂减肥、排毒养颜类中成药中也含有大黄，现在有许多年轻女性开始长时间大量使用减肥药，导致大黄非治疗目的的长期使用，明显增高其不良反应发生率。有文献显示：大黄可使雄性大鼠睾丸细胞间质和生精上皮受损，显示出对生殖系统有明显的毒性作用。本研究以成年雌性大鼠为研究对象，以子宫、卵巢指数、体重增长率、血清中黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）和子宫、卵巢中bax、bcl-2蛋白表达水平为指标，观察大黄水浸剂对成年雌性大鼠生殖动能的影响及其毒性反应的机制；同时以幼年雌性大鼠为研究对象，选取与成年雌性大鼠相同的指标进行研究，观察大黄水浸剂、大黄水煎煮10min和30min剂对幼年雌性大鼠生殖功能的影响及其毒性反应的机制，同时分析其毒性与药液制备方法的关系，为进一步分析其生殖毒性成分奠定基础。第一部分大黄对成年雌性大鼠生殖功能的影响目的：观察大黄水浸剂(RWE)对成年雌性大鼠生殖功能的影响与用药时间和用药剂量之间的关系。方法：8周龄wistar大鼠90只，随机分为大黄水浸剂(RWE)1.0g.kg-1剂量组、2.0g.kg-1剂量组（生药量）、正常对照组(NC)，各剂量组再随机分为灌胃给药30d，40d，50d，60d组,每组10只。取卵巢、子宫称重，计算脏器指数。采用HE染色法进行子宫、卵巢病理学检查；采用Elisa法检测血清中LH、FSH、E2含量；采用免疫组化法检测卵巢、子宫组织中bax、bcl-2蛋白表达水平。结果：1对大鼠子宫、卵巢指数的影响RWE1.0g.kg-1给药60d和2.0g.kg-1给药40d，50d，60d组大鼠子宫指数明显低于NC组(P＜0.05或P＜0.01)；RWE1.0g.kg-1给药60d组和2.0g.kg-1给药30d，40d，50d，60d组大鼠卵巢指数明显低于NC组(P＜0.05或P＜0.01)。不同给药剂量相同给药时间各组间比较：RWE2.0g.kg-1给药50d，60d组子宫、卵巢指数明显低于RWE1.0g.kg-1给药50d，60d组(P＜0.05)。相同给药剂量不同给药时间各组间比较：RWE1.0g.kg-1给药60d组子宫、卵巢指数明显低于给药30d组(P＜0.05）；RWE2.0g.kg-1给药50d、60d组子宫、卵巢指数明显低于给药30d、40d组(P＜0.05)。2对大鼠血清中LH、FSH、E2水平的影响RWE2.0g.kg-1给药50d，60d组大鼠血清中E2水平明显低于NC组，LH、FSH水平明显高于NC组(P＜0.05或P＜0.01)。不同给药剂量相同给药时间各组间比较：RWE2.0g.kg-1给药50d，60d组E2水平明显低于RWE1.0g.kg-1给药50d，60d组，LH，FSH水平明显高于RWE1.0g.kg-1给药50d，60d组(P＜0.05)。相同给药剂量不同给药时间各组间比较：RWE1.0g.kg-1给药60d组E2水平明显低于给药30d组，LH、FSH水平明显高于给药30d组(P＜0.05)；RWE2.0g.kg-1给药50d、60d组E2水平明显低于给药30d、40d组，LH、FSH水平明显高于给药30d、40d组(P＜0.05)。3对大鼠子宫、卵巢中bax、bcl-2蛋白表达的影响RWE1.0g.kg-1给药60d和2.0g.kg-1给药40d，50d，60d组大鼠子宫、卵巢中bcl-2蛋白表达明显低于NC组，bax蛋白表达明显高于NC组(P＜0.05或P＜0.01)。不同给药剂量相同给药时间各组间比较：RWE2.0g.kg-1给药50d，60d组大鼠子宫、卵巢中bcl-2蛋白表达明显低于RWE1.0g.kg-1给药50d，60d组，bax蛋白表达明显高于RWE1.0g.kg-1给药50d，60d组(P＜0.05)。相同给药剂量不同给药时间各组间比较：RWE1.0g.kg-1给药60d组bcl-2蛋白表达明显低于给药30d组，bax蛋白表达明显高于给药30d组(P＜0.05)；RWE2.0g.kg-1给药50d、60d组bcl-2蛋白表达明显低于给药30d、40d组，bax蛋白表达明显高于给药30d、40d组(P＜0.05)。结论：大黄对成年雌性大鼠子宫、卵巢功能具有较强的毒性，其毒性程度有明显的时间和剂量依赖关系。第二部分大黄对幼年雌性大鼠生殖功能的影响目的：观察大黄水浸剂、大黄水煎煮10min和30min剂分别对幼年雌性大鼠生殖功能的影响与用药剂量的关系。方法：4周龄wistar大鼠100只，每组10只，随机分为NC组，大黄水浸剂(RWE)0.5g.kg-1、1.0g.kg-1和2.0g.kg-1剂量组，大黄水煎10min(RDA10min)0.5g.kg-1、1.0g.kg-1和2.0g.kg-1剂量组，大黄水煎30min (RDA30min)0.5g.kg-1、1.0g.kg-1和2.0g.kg-1剂量组(均为生药量)，连续灌胃给药30d。取子宫、卵巢称重，计算脏器指数。采用HE染色法进行子宫、卵巢病理学检查；采用Elisa法检测血清中LH、FSH、E2的含量；采用免疫组化法检测子宫、卵巢组织中bax、bcl-2蛋白表达水平。结果：1对大鼠子宫、卵巢指数的影响1.1RWE1.0g.kg-1和2.0g.kg-1剂量组，RDA10min各剂量组，RDA30min2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢指数明显低于NC组(P＜0.05或P＜0.01)。1.2相同提取方法不同给药剂量各组间比较：RWE2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢指数明显低于RWE0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min2.0g.kg-1、1.0g.kg-1剂量组子宫、卵巢指数明显低于RDA10min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA30min2.0g.kg-1剂量组子宫、卵巢指数明显低于RDA30min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）。1.3相同给药剂量不同提取方法各组间比较：RDA10min0.5g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢指数明显低于RWE0.5g.kg-1和RDA30min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min1.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢指数明显低于RWE1.0g.kg-1和RDA30min1.0g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢指数明显低于RWE2.0g.kg-1和RDA30min2.0g.kg-1剂量组(P＜0.05）。2对大鼠血清中LH、FSH、E2水平的影响2.1RWE1.0g.kg-1、2.0g.kg-1剂量组，RDA10min各剂量组，RDA30min2.0g.kg-1剂量组大鼠血清中E2水平明显低于NC组，LH、FSH水平明显高于NC组（P＜0.05或P＜0.01)。2.2相同提取方法不同给药剂量各组间比较：RWE2.0g.kg-1剂量组大鼠血清中E2水平明显低于RWE0.5g.kg-1剂量组，LH、FSH水平明显高于RWE0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min2.0g.kg-1、1.0g.kg-1剂量组大鼠血清中E2水平明显低于RDA10min0.5g.kg-1剂量组，LH、FSH水平明显高于RDA10min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA30min2.0g.kg-1剂量组大鼠血清中E2水平明显低于RDA30min0.5g.kg-1剂量组，LH、FSH水平明显高于RDA30min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）。2.3相同给药剂量不同提取方法各组间比较：RDA10min0.5g.kg-1剂量组大鼠血清中E2水平明显低于RWE0.5g.kg-1和RDA30min0.5g.kg-1剂量组，LH、FSH水平明显高于RWE0.5g.kg-1和RDA30min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05)；RDA10min1.0g.kg-1剂量组大鼠血清中E2水平明显低于RWE1.0g.kg-1和RDA30min1.0g.kg-1剂量组，LH、FSH水平明显高于RWE1.0g.kg-1和RDA30min1.0g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min2.0g.kg-1剂量组大鼠血清中E2水平明显低于RWE2.0g.kg-1和RDA30min2.0g.kg-1剂量组，LH、FSH水平明显高于RWE2.0g.kg-1和RDA30min2.0g.kg-1剂量组(P＜0.05）。3对大鼠子宫、卵巢中bcl-2、bax蛋白表达的影响3.1RWE1.0g.kg-1、2.0g.kg-1剂量组，RDA10min各剂量组，RDA30min2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢中bcl-2蛋白表达明显低于NC组，bax蛋白表达明显高于NC组（P＜0.05或P＜0.01)。3.2相同提取方法不同给药剂量各组间比较：RWE2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢组织中bcl-2蛋白表达明显低于RWE0.5g.kg-1剂量组，bax蛋白表达明显高于RWE0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min1.0g.kg-1、2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢组织中bcl-2蛋白表达明显低于RDA10min0.5g.kg-1剂量组，bax蛋白表达明显高于RDA10min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA30min2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢组织中bcl-2蛋白表达明显低于RDA30min0.5g.kg-1剂量组，bax蛋白表达明显高于RDA30min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）。3.3相同给药剂量不同提取方法各组间比较：RDA10min0.5g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢组织中bcl-2蛋白表达明显低于RWE0.5g.kg-1和RDA30min0.5g.kg-1剂量组，bax蛋白表达明显高于RWE0.5g.kg-1和RDA30min0.5g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min1.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢组织中bcl-2蛋白表达明显低于RWE1.0g.kg-1和RDA30min1.0g.kg-1剂量组，bax蛋白表达明显高于RWE1.0g.kg-1和RDA30min1.0g.kg-1剂量组(P＜0.05）；RDA10min2.0g.kg-1剂量组大鼠子宫、卵巢组织中bcl-2蛋白表达明显低于RWE2.0g.kg-1和RDA30min2.0g.kg-1剂量组，bax蛋白表达明显高于RWE2.0g.kg-1和RDA30min2.0g.kg-1剂量组(P＜0.05）。结论：大黄对幼年雌性大鼠子宫、卵巢功能具有较强的毒性，其毒性程度具有明显的剂量依赖性；其毒性程度与大黄加热的时间呈负相关，RDA10min提取物对子宫、卵巢的毒性最强。