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乙型肝炎病毒(HBV)感染仍是我国乃至全球范围内主要的公共卫生问题之一。在亚洲母婴传播是HBV最主要的传播途径，宫内感染是免疫接种失败的主要原因。国内多项研究表明无症状HBV携带孕妇孕28周起每四周肌注注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)200-400Iμ，直至临产，能显著降低HBV的宫内感染率。既往研究发现HBV S区野生株和变异株均可通过胎盘感染胎儿，并可能是免疫接种失败的重要原因。HBV前C(precore PC)区是宿主免疫攻击的靶表位，C启动子区(core promoter CP)特别是基本C启动子区(basic core promoter BCP)在病毒复制中起着重要的作用，前C区及CP区变异和宫内感染的关系尚无母亲和新生儿配对的研究报道。国外文献报道长期大剂量应用HBIG可引起HBV S区基因变异使病毒发生逃逸突变；我们课题组最近研究发现产前阻断常规剂量的使用HBIG并没增加HBV S区基因的变异。作为免疫制剂，HBIG对HBV前C区和BCP区有何影响还未有人进行过研究。本课题对HBV前C区和CP区变异与宫内感染的关系进行了探讨，并对产前阻断(产前注射HBIG)与HBV前C区、CP区变异的关系进行了研究。第一部分HBV前C区和C启动区变异与宫内感染的关系目的：探讨孕妇HBV前C区、基本C启动子区(BCP)变异与宫内感染的关系。方法：无症状慢性HBV携带临产孕妇及其新生儿99对(产前阻断组58对，非产前阻断组41对)采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量、EIA法检测HBsAg、HBeAg，22例产前阻断组新生儿EIA法检测血清抗-HBs；99对母子采用巢式PCR法扩增HBV前C区和BCP区核苷酸片断，ABI3730型DNA自动荧光测序仪对PCR产物直接测序。结果：(1)58例产前阻断组新生儿的宫内感染率(22.4％)明显低于41例非产前阻断组新生儿的宫内感染率(43.9％)(x~2=5.15，p=0.023)；22例产前阻断组新生儿9例(40.9％9／22)抗HBs阳性。(2)82例孕妇HBV前C区和BCP区核苷酸片断扩增测序成功，最常见的变异是1896G→A、1762A→T、1764G→A、1752A→G、1799C→G变异。1896G→A变异孕妇的宫内感染率(25.0％)与未检出1896G→A变异孕妇的宫内感染率(37.0％)差异无显著性(x~2=0.236，p=0.627)；1762A→T／1764G→A连锁变异孕妇的宫内感染率(22.2％)与未检出该连锁变异孕妇的宫内感染率(37.2％)差异无显著性(Fisher’s精确检验p=0.470)；1752A→G／1799C→G连锁变异孕妇的宫内感染率(26.3％)与未检出该连锁变异孕妇的宫内感染率(36.5％)差异无显著性(x~2=0.297，p=0.586)；1799C→G单独变异宫内感染率(45.6％)与未检出该点单独变异孕妇的宫内感染率(32.4％)无显著性差异(x~2=0.258，p=0.611)；各常见变异孕妇组间宫内感染率也无显著性差异(Fisher’s精确检验p均＞0.05)。(3)60对母子均扩增测序成功，母子前C区和BCP区核苷酸序列存在很大差异，45对母子前C区和BCP区核苷酸序列不一致。结论：(1)产前阻断能显著降低HBV的宫内感染率，HBIG中的抗-HBs经胎盘摄取，使胎儿提早获得被动免疫可能是其机制；(2)HBV前C区和BCP区常见变异对宫内感染率无明显影响；(3)HBV前C区和BCP区变异株和野生株均可通过胎盘感染胎儿，变异株和野生株的传播按其生物学特性对个体有所选择。第二部分产前注射HBIG对HBV前C区和C启动子区的影响目的：探讨产前阻断(产前注射HBIG)对乙肝病毒前C区和BCP区核苷酸序列的影响。方法：无症状慢性HBV携带孕妇120例(HBIG组67例，非HBIG组53例)采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量、EIA法检测血清HBsAg、HBeAg，巢式PCR法扩增HBV DNA前C区和BCP区核苷酸片断，ABI3730型DNA自动荧光测序仪对PCR产物直接测序。结果：(1)HBIG组33例孕妇收集到阻断前后双份血清，阻断前后血清HBV DNA载量无显著性差异(t=0.375，P=0.709)；23例孕妇阻断前后HBV DNA前C区、BCP区均扩增测序成功，阻断前／后HBV前C区+BCP、前C区、BCP区核苷酸的替代变异率分别为0.15％／0.14％、0.70％／0.55％、1.69％／1.65％，阻断前后均无显著性差异(Fisher’s精确检验p均＞0.05)；阻断前后1896G→A、1899G→A、1762A→T、1764G→A等热点总变异发生率分别为27.2％、13.0％，阻断后热点总变异发生率明显低于阻断前(x~2=5.717，p=0.017)，1896G→A、1899G→A、1762A→T、1764G→A各热点变异的发生率阻断前／后分别为30.4％／17.4％、17.4％／4.3％、26.1％／13.0％、34.8％／17.4％，阻断后各热点变异的发生率均低于阻断前，但统计学检验无显著性差异(p＞0.05)；13例阻断前或阻断后检测到热点变异的孕妇阻断后热点总变异发生率(23.1％)明显低于阻断前(48.1％)(x~2=7.09，p=0.008)；(2)53例HBIG组孕妇／47例非HBIG组孕妇临产时HBV DNA前C区+BCP、前C区、BCP区核苷酸的替代变异率分别为0.9％／0.8％、0.3％／0.3％、1.1％／0.9％，两组无显著性差异(Fisher’s精确检验p＞0.05)；HBIG组／非HBIG组孕妇1896G→A、1899G→A、1762A→T、1764G→A热点总变异发生率及各热点变异发生率分别为5.7％／10.1％、9.4％／14.9％、0／2.1％、7.5％／10.6％、5.7％／12.8％，HBIG组热点总变异发生率及各热点变异的发生率均低于非HBIG组，但统计学检验无显著性差异(p＞0.05)。结论：(1)产前阻断(注射HBIG)不能降低孕妇体内的HBV DNA水平；(2)产前阻断并不增加孕妇HBV DNA前C区、基本核心启动子区核苷酸变异；(3)产前阻断可能使孕妇体内HBV前C区、基本核心启动子区热点变异的发生减少，这种转变的意义和机理尚需进一步研究。