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[背景]骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasm, MPN)根据分子生物学特性分为BCR-ABL阳性和BCR-ABL阴性两类疾病。BCR-ABL阳性MPN主要为慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia, CML),经典BCR-ABL阴性MPN主要包括真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)、原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)、原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis, PMF)等。JAK2V617F突变在MPN的诊断及鉴别诊断中具有重要意义,自2005年至今,国内外已有不少研究组对JAK2 V617F突变做了相关研究,但多数为定性研究,仅有少数研究组对其转录本水平、突变负荷、突变比例做过相关研究,但此类研究大都病种单一、样本量偏少、定量方法敏感性不高,因而结果差别较大[1-3]。[目的]为了更好地揭示JAK2 V617F突变的内在机制及其与MPN患者实验室及临床特征之间的关系,本研究对415例MPN患者,采用更加敏感的MGB (Minor groove binder) Taqman双荧光探针法,对JAK2 V617F突变进行定量检测,试图通过本研究为MPN的诊断分型、临床治疗、疾病进展、相互转化及预后判断提供更多的帮助。[方法]选取2011年9月至2014年5月山东大学齐鲁医院门诊及住院MPN患者及查体正常个体(JAK2 V617F突变负荷为0%)作为研究对象,收集外周静脉血或者骨髓液。分别裂解红细胞、提取基因组DNA、PCR扩增,50℃2分钟,95℃10分钟预变性；95℃15秒,62℃1分钟,进行45个PCR循环,在PCR循环第二步60℃时收集荧光信号。分别检测病例组与对照组各病例中JAK2V617F突变发生情况,并根据公式计算出所有研究对象的突变负荷。然后,根据JAK2V617F的突变负荷情况,再将BCR/ABL阴性的MPN分为JAK2 V617F高突变组、低突变组和阴性组,比较各组间患者的临床特征、实验室指标以及治疗效果与JAK2 V617F突变负荷的关系。[结果]415例MPN患者共检出JAK2 V617F(+)患者236例(56.9%),其中109例真性红细胞增多症(PV)检出91例(83.5%),143例原发性血小板增多症(ET)检出80例(55.9%),74例原发性骨髓纤维化(PMF)检出31例(41.9%),51例MPN不能分类(MPN-U)检出33例(64.7%),1例慢性中性粒细胞白血病(CNL)为纯合突变,4例高嗜酸粒细胞增多症(HES)和33例慢性粒细胞白血病(CML)未发现存在突变。236例JAK2 V617F(+)患者中12例为纯合突变(其中PV、MPN-U各4例,PMF 2例,ET、CNL各1例)。JAK2 V617F突变以低突变负荷(突变负荷<50%)为主(68.8%),突变负荷以PV组最大,PMF次之,ET最小。PV患者年龄、白细胞计数与突变负荷呈明显正相关性；ET患者白细胞计数与突变负荷呈明显正相关性；PMF患者白细胞计数、血红蛋白水平及血小板计数与突变负荷均呈明显正相关性。突变负荷与MPN其它临床参数无明显相关性。[结论]JAK2 V617F突变负荷从高到低依次为PV、PMF和ET,突变状态以杂合突变为主,随着患者年龄、血红蛋白水平、白细胞及血小板计数升高,突变负荷增加。