【摘 要】
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该研究通过基因工程的手段,以根癌农杆菌为介导,将抗寒基因转导入黄瓜,建立了黄瓜的高效再生体系和遗传转化体系,探讨了影响黄瓜不定芽再生率和遗传转化效率的主要因素,其研
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该研究通过基因工程的手段,以根癌农杆菌为介导,将抗寒基因转导入黄瓜,建立了黄瓜的高效再生体系和遗传转化体系,探讨了影响黄瓜不定芽再生率和遗传转化效率的主要因素,其研究结果如下:一、建立起了黄瓜高效不定芽再生系统;1.播种方式: 该试验以垂直插入的方法效果较好,垂直插入的1d带柄子叶不定芽再生率高达96.88％,而平放的播种方式不定芽再生率仅有32.18%.2.外植体类型: 该试验采用五种外植体类型,其中以带柄子叶的不定芽再生率最高为96.88%,下胚轴的不定芽再生率最低,仅为2.28%.其余类型介于两者之间.3.叶龄:1-2d叶龄的带柄子叶不定芽再生率最高,达到了90%以上.随着叶龄的增加,不定芽再生率随之下降.4.基因型:在五种基因型当中以M<,6>的不定芽再生率最高,达到95%,M<,10>的不定芽再生率最低,仅为62.5%.其不定芽再生率顺序为M<,6>>M<,13>>M<,7>>M<,12>>M<,10>.5.培养基中所添加的激素以及激素配比:培养基中以添加6-BA和IAA的效果较好,当两者的配比为0.2mg/LIAA+1.0mg/LBA时,不定芽再生率可达到90%以上.6.蔗糖浓度:蔗糖浓度为3%时芽再生率最高,达到93.75%.二、建立了根癌农杆菌介导的黄瓜遗传转化系统;在上述工作的基础上,建立了根癌农杆菌介导的黄瓜遗传转化系统.
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