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猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）resp株是北美国家最常用的疫苗株之一，在Marc-145细胞上可产生典型的细胞病变（CPE），目前该毒株已广泛用于弱毒疫苗与灭活疫苗的生产与制备。但PRRSV-resp)株在Mare-145细胞上的增殖受到诸多因素的影响，滴度很不稳定，长期以来严重制约着疫苗的生产制备与推广应用。为此，木文对PRRSV-resp株在Marc-145细胞上的增殖条件进行了深入探讨与优化，为猪繁殖与呼吸综合征疫苗的大规模生产与推广应用打下了良好基础。试验表明，以PRRSV-resp株在Mare-145细胞上的滴度高低为标准，适合PRRSV增殖的各种最佳条件为：细胞密度10万-I5万/ml，培养基MEM，血清浓度8％，PH范围7.0-7.4，接毒量200TCID50/ml，病毒吸附时间37℃，30分钟，接种后72-96小时收毒，收毒后于-20℃冻融3次。 环磷酰预处理技术常用于制备复杂组织中未知抗原或稀有抗原的抗体，但环磷酰胺的注射剂量和免疫程序很难把握。本文妥善解决了这一难题，并采用环磷酰胺预处理法成功制备了高纯度的兔抗PRRSV-resp株高免血清。在本试验中，以正常Mare-145细胞成分和环磷酰胺预处理试验兔，再以PRRSV-resp株经灭活、乳化制成油佐剂抗原多次免疫试验兔，获得了中和效价达1：32，ELISA效价达1：640的兔抗PRRSV高免血清，为下一步PRRSV的纯化与诊断奠定了基础。 初步建立了间接酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接荧光抗体试验（IFA），用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体。利用在猪肺泡巨噬细胞（PAM）上增殖的PRRSV-resp株，采用长程免疫法免疫BALB/C小鼠，用PEG-1500进行细胞融合，融合率为70.6％。初检阳性率为6.3％。经2次亚克隆获得了2株能稳定分泌PRRSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。免疫转印试验显示，这两株单抗分别可以与PRRSV 19KD蛋白（M蛋白）和45-50KD蛋白（GP3）特异性结合，具有一定的诊断价值和进一步开发研究的前景。