玉屏风散对鱼类非特异性免疫指标及免疫相关基因表达的影响

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随着我国鱼类养殖业的不断扩大,高密度、集约化的养殖模式导致病害的频繁发生与流行,近年来病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫病造成鱼类养殖业的巨大损失。传统的化学药物和抗生素在治疗鱼病过程中会造成环境污染、病原生物耐药性增强和组织药物残留等问题,严重威胁人类的健康和安全。中药添加剂具有成本低、副作用小、使用安全、应用范围广的特点,可以直接添加到饲料中,不仅可以抑杀病原微生物,还可以增强鱼体免疫系统,提高鱼体的抗应激能力和防御机能,从而达到预防疾病的目的。  本研究以罗非鱼和草鱼为研究对象,在基础饲料中分别添加2.5%、5%、10%的玉屏风散和1%的芪参散配成试验饲料,饲喂试验鱼2周,然后分别观察两种中药对罗非鱼(体重约220 g)的生长、非特异性免疫及免疫相关基因表达的影响以及对草鱼(体重约20 g)免疫保护率的影响。实验结果如下:  (1)各中药组均能提高罗非鱼增重率,10%玉屏风散组效果最显著;各试验组中罗非鱼肝、肾、脾体指数和各血液学指标与对照组无显著差异;各中药组罗非鱼谷草转氨酶AST和谷丙转氨酶ALT含量均不高于空白对照组;2.5%、10%玉屏风散组和1%芪参散组碱性磷酸酶AKP含量均高于对照组(P>0.05);  (2)各药物组罗非鱼溶菌酶活性均高于对照组,且2.5%玉屏风散组与对照组差异显著(P<0.05);玉屏风散各剂量组罗非鱼呼吸爆发活性均高于对照组(P>0.05);玉屏风散各剂量组均能提高罗非鱼体内外的吞噬活性(P>0.05);  (3)体内实验罗非鱼肝脏中热休克蛋白70HSP70在各试验组中表达量均上调,肾脏中HSP70在2.5%、5%玉屏风散组表达量上调,脾脏中HSP70在各试验组中表达量均下调;肝脏中转化生长因子受体TGFRⅢ在2.5%玉屏风散组表达量上调,肾脏中TGFRⅢ在2.5%玉屏风散组和1%芪参散组表达量上调,脾脏中TGFRⅢ在各试验组中表达量均上调;肝脏中各组IL-1β表达均上调,且5%与10%玉屏风散组差异显著(P<0.05),肾脏中IL-1β表达均上调,脾脏中各组IL-1β表达除芪参散组下调外,其他各组均上调;肝脏中除2.5%玉屏风散组TNF表达量下调外,其他各组均上调,肾脏中TNF表达量均上调,且2.5%组与10%组差异显著(P<0.05),脾脏中各组TNF表达均上调,且2.5%、5%玉屏风散组与10%玉屏风散组和1%芪参散组差异显著(P<0.05)。体外实验中整体基因表达量随药物处理时间呈先上调后下调的趋势,在处理12h后,各玉屏风散浓度组中各基因的表达量均到达峰值。  (4)玉屏风散各剂量组能够提高草鱼对嗜水气单胞菌的抵抗能力,表现为死亡率降低和进入血液的细菌减少,其中5%玉屏风散组效果最佳。试验表明玉屏风散能够有效促进罗非鱼生长,对其非特异性免疫指标以及免疫相关基因表达均有不同程度的促进作用,并能够有效的提高草鱼的免疫保护率。
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