论文部分内容阅读
目的 番红花酸钠是一种具有潜在抗肿瘤药物增敏作用的化合物,主要针对肿瘤缺氧微环境,可以提高乏氧组织含氧量,从而使癌细胞更容易受到放射线和化学药物的治疗。本课题目标是对番红花酸盐制备工艺和体内生物利用度进行研究,结合企业生产条件与工艺的可行性,通过创新的工艺制备高纯度番红花酸钠,探究其体内生物利用度,为化合物应用于恶性胶质瘤治疗及基于该化合物的新药后续研究提供实验基础。方法 1)番红花酸钠工艺优化和制备:通过比较水提法和醇提法、两种常用大孔树脂粗提,以及采用LH-20葡聚糖凝胶或聚酰胺精制等多种不同工艺的优劣,最终确定一个有效、经济,且适合放大生产的工艺路线制备高纯度番红花酸钠;2)番红花酸及番红花钠结构确证:利用红外吸收光谱,核磁共振氢谱(1H NMR),核磁共振碳谱(13C NMR),质谱确证番红花酸及番红花酸钠的化学结构式;3)番红花酸钠口服生物利用度研究:选择检疫合格SD大鼠,分成番红花酸钠低、高剂量灌胃组和静注组,取血浆样品上清液进行体内药代动力学分析。结果 1)本研究最终确定的工艺路线是以水溶液常温浸泡两次提取得到粗提液,采用HZ-801大孔树脂柱层析提纯,分别用纯化水、25%乙醇洗脱除杂,70%乙醇收集番红花苷部分,100～200目聚酰胺柱层析精制,纯化水除杂,20%乙醇收集番红花苷,冷冻干燥得到关键中间体番红花苷,最后用2%氢氧化钠水解得到番红花酸钠,经HPLC检测含量达到99.5%。2)番红花酸的分子式为C20H24O4,分子量为328,样品中含24个氢质子的共振峰以及20个碳原子,番红花酸钠的分子式为C20H22O4Na2,分子量为372,样品中含22个氢质子的共振峰以及20个碳原子。3)本研究建立了番红花酸钠盐大鼠血浆高效液相测定方法,样品中内源性杂质不干扰分析测定。番红花酸钠盐测定线性范围为0.05-100 μg/mL。采用统计矩法进行计算,得到大鼠灌胃和静注给予番红花酸及番红花酸钠后主要吸收动力学参数。结论 1)该工艺绿色环保,无需特殊设备和特殊溶剂,并且能够从易获得且价格低廉的药材代替名贵药材藏红花提取得主要成分番红花苷-I,最终水解及精制得到高纯度番红花酸钠。2)样品的 IR,1H NMR,1H-1H COSY,13C NMR,DEPT 135,HSQC 及质谱等的测定结果与番红花酸钠的结构特征相符;3)在本试验条件下,SD大鼠血浆中25 mg/kg、100 mg/kg两个剂量番红花酸钠的生物利用度分别为54.56%、43.77%。