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目的：观察慢病毒介导miR-21反义寡核苷酸下调大肠癌HT-29细胞内miR-21表达对大肠癌细胞生物学行为及化放疗敏感性的影响。探讨miR-21成为大肠癌靶向治疗的新靶点的可能性。方法：构建含miR-21反义寡核苷酸的慢病毒载体，通过慢病毒感染将miR-21ASO片段导入大肠癌HT-29细胞内下调miR-21表达，将转染miR-21ASO组作为实验组，另设正常HT-29细胞未转染组（Control组）、转染空载慢病毒组（HT-29/NC组）、转染U6snRNA组(HT-29/U6组)为对照组，用探针法PCR检测各组HT-29细胞内miR-21表达差异，验证经转染慢病毒载体后，实验组miR-21表达下调，再筛选出稳定转染细胞株进行后续各实验以研究下调HT-29细胞内miR-21表达后其生物学行为的变化以及对放化疗敏感性的影响。即通过细胞直接计数法检测各组细胞增殖情况，应用流式细胞术检测各组细胞细胞周期变化及细胞凋亡率是否有差异，通过细胞克隆形成实验收集各组细胞克隆形成率来分析细胞克隆形成情况，Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力，MTT法检测不同梯度药物浓度的肿瘤抑制率，以及经总量10GyX线照射后各组肿瘤细胞的生长抑制率。结果：1、转染miR-21ASO的实验组较正常HT-29细胞组miR-21表达明显下降，具有显著差异（P值＜0.01）；转染空载慢病毒组及U6snRNA对照组与正常组miR-21表达无明显差异。2、通过细胞直接计数法连续7天分别计数各组细胞数目，绘制细胞生长曲线，HT-29/ASO组细胞增殖速率相较于其他各对照组细胞明显更低，（P值＜0.01），而Control组、NC组、U6组各组间无显著差异。3、流式细胞仪检测结果显示转染miR-21ASO后细胞早期凋亡率较对照组明显增加，G0/G1期所占细胞总数百分比上升，而S期细胞百分比下降。4、细胞克隆形成实验显示HT-29/ASO组细胞克隆形成率明显低于HT-29组、HT-29/NC组及HT-29/U6组（P值＜0.01），而HT-29组、HT-29/NC组及HT-29/U6组之间细胞克隆形成率无显著差异。5、细胞侵袭实验显示转染miR-21ASO的实验组细胞侵袭能力明显低于对照组，下调miR-21表达的HT-29/ASO组穿过Matrigel膜的细胞数最少，与其他各组相比差异有统计学意义（P值＜0.01），HT-29/NC组及HT-29/U6组与未转染慢病毒Control组无明显差异（P值＞0.05）。6、MTT法检测下调miR-21后HT-29细胞对5-FU药物敏感性实验显示，在不同5-FU药物浓度下，HT-29/ASO转染组细胞的生长抑制率较各对照组细胞生长抑制率显著升高，差异具有统计学意义（P值＜0.01），HT-29/ASO组增敏倍数为2.35倍。7、MTT法检测下调miR-21后HT-29细胞对放疗敏感性实验，结果显示，总量10GyX线照射后HT-29/ASO组肿瘤细胞抑制率明显高于HT-29、HT-29/NC、HT-29/U6组，而各对照组间无明显差异。结论：慢病毒介导miR-21ASO感染HT-29细胞后，细胞的增殖、侵袭、克隆能力减弱，凋亡增加，对化放疗敏感性增强。miR-21可能在大肠癌的生长、侵袭、转移及化放疗敏感性中均发挥着抑制癌细胞发展的作用，有可能成为大肠癌治疗的新靶点。