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采用亲和层析法,分离纯化红鳍笛鲷血清免疫球蛋白(IgM)。用羊IgG免疫红鳍笛鲷产生特异性抗体,免疫扩散法测得其血清效价为1:8,将偶联羊IgG的琼脂糖装柱纯化红鳍笛鲷血清中的特异性抗体。经SDS-PAGE电泳,图谱显示二条主区带,即重链和轻链。重、轻链分子量分别为80kD和29kD;图谱中除二条主区带外,无杂蛋白带,说明纯化的血清IgM的纯度很高。免疫扩散法,发现红鳍笛鲷血清IgM只与兔抗红鳍笛鲷血清IgM出现沉淀反应;而人IgM只与羊抗人IgM血清发生沉淀反应,这些表明红鳍笛鲷血清IgM与人IgM之间无免疫同源性。
收集正常生活下的非免疫红鳍笛鲷的胆汁和皮肤粘液,比较它们与分离纯化的红鳍笛鲷血清IgM之间的同源性,发现胆汁和皮肽粘液都与兔抗红鳍笛鲷血清IgM的抗血清有沉淀反应。结果表明:胆汁和皮肤粘液中存在的IgM的某些理化性质同血清中的IgM相似,由此推断,红鳍笛鲷的胆汁和皮肤粘液中IgM的来源可能与血清中IgM具有一定的免疫同源性。
采用单向放射免疫扩散法,测出红鳍笛鲷未免向.清中TgM的含量达达13.5mg/ml,当用羊IgG免疫红鳍笛鲷时,血清抗体效价达到25.8mg/mL。
用溶藻弧菌的灭活全菌苗作为免疫原,分别以1×lO8<8>cfu/mL,l×10<9>cfu/mL和9×10<9>cfu/mL三个浓度免疫接种红鳍笛鲷,通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价和鱼体攻毒试验,探讨了红鳍笛鲷对灭活的溶藻弧菌菌苗的免疫应答状况。结果表明为:①免疫后从第7d车开始,3组免疫鱼血清中都检测到抗体。注射疫苗1×10<8>cfu/mL和1×10<9>cfu/mL组都在第28d抗体效价达到最高,分别为1:98.4和1:135.3;而注射疫苗9×10<9>cfu/mL组血清抗体效价升高很快,第2周抗体效价就达到最高的水平1:384;直到第6周3组鱼血清抗体效价仍然保持在较高水平。②在免疫后50天,用浓度为1.0×lO<9>cfu/mL的溶藻弧菌悬液进行攻毒,测得的免疫保护率分别为56%、69%、80%。