小麦耐盐突变体RAPD分子标记的研究

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不耐盐小麦—冀麦24的成熟胚在正定霉素的诱变下,得到耐盐的突变品种—8901-17,经鉴定为一级耐盐.首先,该研究以冀麦24和其耐盐后代8901-17为材料,用RAPD技术对其进行比较分析研究.在所用的280个引物中,有35个扩增出多态性,既有量的差异又有质的差异,初步断定此35个引物扩增出的多态性与突变有关.其次,通过比较两者质膜透性的差别,在生理水平证明8901-17耐盐变异的真实性.第三,通过对冀麦24和8901-17的醇溶蛋白电泳比较分析,在蛋白质水平证明了突变的存在.第四,用BSA法(Bulked Segregent Analysis)在冀麦24×8901-17的F<,2>群体中,选极耐盐和极不耐盐的单株,建立耐盐DNA池和不耐盐DNA池,用能在冀麦24和8901-17之间扩增出多态性的35个引物在两个池之间RAPD,其中5个引物在两个池之间扩增出多态性,它们分别为:pronA9、OpronB4、OpronB15、OpronB17、OpronQ4,经过对单株的检测,初步表明,耐盐性状为多基因控制,其中也有主效基因的作用.第五,在8901-17×中麦9的F<,2>群体中,建立耐盐DNA池和不耐盐DNA池,用以上5个引物在两个池之间进行RAPD,其中OpronQ4扩增出多态性,对单株进行分析,证明它的扩增产物是与耐盐突变紧密连锁的RAPD分子标记.除此之外,该研究还发展了一种以小麦老叶子和秸秆为材料微量提取DNA的方法,同时还分析了影响DNA提取和RAPD扩增结果的诸多因素.
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