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本研究利用SD大鼠作为模型,探究了多种不同的佐剂与GnRH合成肽去势疫苗配伍的效果。筛选出一组免疫去势效果好、安全性高的免疫佐剂与抗原。为去势疫苗产品的后续研发提供数据基础和理论依据。1.GnRH合成肽去势疫苗的制备以多肽固相合成法制得三种结构不同的抗原。G01结构为Th-（GnRH）2,纯度为95.52%;G01-1结构为Th-（GnRH）2-C-Palmitic,纯度为纯度90.29%;G01-2结构为Th-GnRH-K-（C-Palmitic,GnRH）,纯度为92.16%。质谱检测分子量符合理论值。选取以下八种佐剂:（1）油包水剂型:MONTNIDETMISA 61 VG;（2）水包油包水剂型:MONTANIDETMISA 201 VG;（3）水包油剂型:MONTANIDETMISA 15A VG;（4）水溶性佐剂:MONTANIDETMIMS 1313 VG、MONTANIDETMGEL 02、铝胶佐剂、帕米卡佐剂和SDA7749。将上述三种抗原与八种佐剂相配伍,共制备11种疫苗。乳剂类疫苗稳定性、粘稠度符合质量检验标准;水溶性佐剂类疫苗稳定性、浊度检验合格。按《中国兽药典》（2015版）方法进行无菌检验,结果合格。制得质量合格的GnRH合成肽免疫去势疫苗,可用于下一步动物实验。2.乳液类佐剂的筛选选取40只8周龄大小的雄性SD大鼠,随机分为4组。抗原为G01,佐剂分别为MONTANIDETMISA 61VG（油包水）、MONTANIDETMISA 201VG（水包油包水）、MONTANIDETMISA 15A VG（水包油）。9周龄首免,11周龄二免,每两周称重并采血,检测血清睾酮含量、抗体水平。23周龄处死,检测睾丸大小、重量并制作组织切片。ELISA结果显示:油包水组的抗体滴度极显著高于其余免疫组（P＜0.01）。油包水佐剂组和水包油包水佐剂组的血清睾酮浓度在首免后6周至实验结束均低于0.1 ng/m L,极显著低于水包油佐剂组（P＜0.01）。油包水佐剂组睾丸重量降至对照组的1/6,水包油包水组的睾丸重量下降到对照组睾丸的1/3。组织切片显示,水包油包水佐剂组的睾丸组织中曲细精管上皮组织严重萎缩,管内仅有少数的精原细胞。实验结果表明:油包水佐剂和水包油包水佐剂可对GnRH合成肽去势疫苗起到良好的增效作用。油包水佐剂组血清抗体滴度更高,但水包油包水佐剂组矿物油用量更少,安全性更高。3.水溶性佐剂的筛选选取70只8周龄大小的雄性SD大鼠,随机分为7组。抗原为G01,佐剂分别为MONTANIDETMGEL 02、帕米卡佐剂（两种配制比例）、SDA7749、MONTANIDETMIMS1313 VG、铝胶佐剂。9周龄首免,11周龄二免,每两周称重并采血,检测血清睾酮含量、抗体水平。23周龄处死,检测睾丸大小、重量并制作组织切片。ELISA结果显示:GEL 02佐剂组平均血清抗体滴度最高;其次为1313 VG组和两个帕米卡佐剂组,二者峰值相当,但帕米卡佐剂组的抗体滴度下降较快。SDA7749组和铝胶佐剂组诱导产生的抗体滴度较低。GEL 02剂组从首免后8周至实验结束,血清睾酮浓度均低于0.1 ng/m L,其余免疫组未下降至有效浓度以下。GEL 02佐剂组睾丸重量降至对照组的1/5左右;1313 VG佐剂组的睾丸重量为空白对照组的1/3左右;其余佐剂组睾丸重量为对照组睾丸重量的2/3以上。组织切片及Johnsen评分显示:GEL 02佐剂组的睾丸破坏程度与其余免疫组有极显著差异（P＜0.01）。GEL 02佐剂组的SD大鼠体重自首免后4周起显著低于其他组别（P＜0.05）。实验结果表明:MONTANIDETM GEL 02佐剂对GnRH合成肽去势疫苗的增效作用最佳,但安全性尚待进一步测验。帕米卡佐剂和MONTANIDETM IMS 1313 VG对GnRH合成肽去势疫苗有一定的增效作用,可考虑与其他具有载体活性的佐剂联用。4.在GnRH合成肽不同位置添加十六烷酸对疫苗的影响本章以免疫增效作用佳、安全良好的MONTANIDETMISA 201VG作为候选佐剂,探究在肽链不同位置添加十六烷酸对GnRH合成肽去势疫苗的增效作用。选取40只8周龄大小的雄性SD大鼠,随机分为4组。分别为未改结构肽链G01组、直链结构肽链G01-1组、支链结构肽链G01-2组和空白对照组（肽链结构见摘要1）。9周龄首免,11周龄二免,23周龄处死。每两周采血一次,检测血清睾酮含量与抗体滴度。实验数据显示,添加十六烷酸的免疫组的抗体滴度峰值均有上升。支链结构组的抗体滴度峰值高、下降慢。免疫组的血清睾酮浓度均下降至有效浓度（0.1 ng/m L）以下,支链组的睾酮浓度下降速度快于其余两组。实验结果表明:添加十六烷酸可有效提高合成肽GnRH疫苗的免疫效果,于侧链添加十六烷酸对合成肽GnRH疫苗的增效作用更佳。本研究共筛选了八种佐剂与三种抗原。以MONTANIDETMISA 201VG水包油包水佐剂的免疫增效作用佳,安全性高;于侧链添加十六烷酸脂质尾的抗原与MONTANIDETMISA 201VG配伍时,可使免疫去势效果得到进一步提升。为合成肽去势疫苗产品的开发提供了数据基础和理论依据。