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本实验以斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)(初均重为35.0±0.09g)为研究对象,饲喂亮氨酸(Leu)水平分别为1.99%、2.79%、3.59%、4.39%、5.19%、5.99%的6组实验饲料(记作D1.99、D2.79、D3.59、D4.39、D5.19、D5.99)8周,测定斜带石斑鱼生长性能、全鱼体成分、生化指标,分析肝脏和肠道组织形态学及肌肉、肝脏、肠道中mTOR信号通路相关基因表达量,探明斜带石斑鱼对饲料中Leu的最适需要量,并初步探讨饲料Leu水平与组织m TOR信号通路的关系。主要研究结果如下:1.各组斜带石斑鱼的成活率均在98%以上,增重率、特定生长率、摄食量、肝体比、肥满度均随饲料Leu水平的升高,呈先上升再下降的趋势,均在D3.59组达到最大值,其中D1.99组摄食量显著低于其他各组(P<0.05);肥满度在D3.59与D4.39组之间无显著差异(P>0.05),但均显著高于其他各组(P<0.05);增重率、特定生长率、肝体比各组之间差异不显著(P>0.05)。饲料系数随饲料Leu水平的升高先降低再升高,在D4.39组最低(P>0.05)。全鱼粗蛋白和粗脂肪含量随饲料Leu水平的升高而先上升再下降。粗蛋白含量在D3.59组最高,且显著高于D1.99、D5.99组(P<0.01),D4.39组显著高于D5.99组(P<0.05),但D3.59与D4.39无显著差异(P>0.05);粗脂肪含量在D4.39组最高,且显著高于D1.99、D5.99组(P<0.05),但与其他组无显著差异(P>0.05)。全鱼灰分和水分含量随饲料Leu水平升高先下降后上升,均在D3.59组最低,且显著低于D1.99组(P<0.05),但与其他各组间无显著差异(P>0.05);D3.59组水分含量显著低于D5.19、D5.99组(P<0.05),但与其他各组无显著差异(P>0.05)。肝脏GPT、GOT、BCKDK、血清SOD活力随饲料Leu水平升高先上升后下降,其中D3.59组GOT活力显著高于D1.99、D5.19、D5.99组(P<0.05),BCKDK在D5.19组活力极显著高于D1.99、D2.79、D5.99组(P<0.01),D3.59、D4.39组活力显著高于D1.99组(P<0.05),但D3.59、D4.39、D5.19之间差异不显著(P>0.05)。肝脏TG、T-CHO含量和血清GPT、GOT活力随饲料Leu水平升高而先下降后上升,肝脏TG、T-CHO含量均在D3.59组最低,显著低于D5.19、D5.99组(P<0.05);血清GPT、GOT活力均在D4.39组低,D1.99组GPT活力显著高于其他各组(P<0.05);血清TG、CHO含量未产生显著影响(P>0.05)。以斜带斑鱼的增重率和饲料系数为衡量指标,经过二次回归分析,得出斜带石斑鱼最适Leu添加量分别饲料水平的4.26%和4.48%,分别占蛋白水平的8.88%和9.33%。2.随着饲料Leu水平的增加,前肠、中肠、后肠粘膜褶皱的高度和数量及肌肉层厚度均先增加再降低,最高值在D3.59或D4.39组,其中,D2.79、D3.59组前肠粘膜褶皱数量显著高于其他各组(P<0.05)。D3.59组中肠粘膜褶皱数量显著多于D5.19组(P<0.05)。D5.99组后肠粘膜褶皱高度显著低于其他组(P<0.05)。D1.99、D2.79、D3.59组后肠肌肉层厚度显著高于D5.99组(P<0.05)。前肠D1.99组杯状细胞密度较其他组小,且纹状缘不整齐。D5.99组的粘膜褶皱稀疏,固有层变窄,纹状缘不整齐。中肠D5.19组纹状缘散乱有间隙。后肠中D1.99和D5.99组粘膜褶皱稀疏散乱。D1.99组肝细胞大小不均一,肝细胞索短小,数量少,细胞有空泡化现象,D5.19和D5.99肝细胞膨大,肝细胞索变短,数量减少,其间散布着较多的脂肪滴或空泡,其他各组未见异常。可见,D1.99、D5.19和D5.99组肠道和肝脏组织结构发生了异常变化,D3.59和D4.39组肠道和肝脏组织形态情况均好于其他组,这与在生长性能的结果是一致的。3.随着饲料Leu水平的增加,斜带石斑鱼肠道mLST8、RagC/D、Raptor、mTOR和肝脏SLC7A5、Tel2以及肌肉、肝脏和肠道Ragulator的表达量均先升高再降低,最高值多数出现在D3.59或D4.39组,其中,D4.39组肠道mLST8显著高于D1.99、D2.79组(P<0.05);D3.59、D4.39组肠道RagC/D无差异(P>0.05),但显著高于其他各组(P<0.05);D2.79、D3.59组肠道Raptor表达量无差异(P>0.05),但显著高于其他各组;D4.39组肠道mTOR表达量显著高于D1.99组(P<0.05),但与其他组无差异(P>0.05);D3.59组肝脏SLC7A5表达量显著高于其他各组(P<0.01);D2.79组肝脏Tel2表达量显著高于D5.99组(P<0.05),与其他组无差异(P>0.05);D4.39组肌肉Ragulator表达量显著高于D1.99、D2.79组(P<0.05),但与其他组无差异(P>0.05);D4.39组肝脏Ragulator表达量显著高于其他各组(P<0.05);D3.59组肠道Ragulator表达量显著高于D5.19、D5.99组(P<0.05),但与其他组无差异(P>0.05)。肌肉中SLC7A5和肠道中V-ATPase的表达量随Leu水平先降低再升高,以D4.39组为最低。其中,肌肉中SLC7A5表达量在D4.39组显著低于D1.99组(P<0.01)和D5.99组(P<0.05),与其他组无差异(P>0.05);肠道中V-ATPase在D1.99组显著高于其他各组(P<0.05)。肌肉中S6K表达量随Leu水平增加呈下降趋势,且D1.99组显著高于其他各组(P<0.05)。可见,饲料Leu水平对激活mTOR信号通路蛋白质合成途径的上游基因表达的影响更显著,而对下游基因表达的影响较小。