电针对SAMP8小鼠海马区PS1蛋白和NCT蛋白表达的影响

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研究背景:阿尔茨海默病(Alzheimer Disease, AD)又称为老年性痴呆,是一种中枢神经系统的退变性疾病,以进行性的行为障碍和记忆能力损害为主要临床表现,临床上除了表现为记忆与行为障碍外,其认知,语言及人格改变等也可出现异常[1]。随着世界人口老龄化的进程逐渐加剧,AD的发病率和患病率也相应的出现逐年增长的趋势,不仅严重威胁到老年人的身心健康与生活质量,给患者本人造成痛苦和心理负担,还给患者的家庭和社会带来沉重的精神压力与经济负担,成为医学上的难题和严重的社会问题。因此,防治AD已经成为当今老年疾病研究领域中最重要前沿课题之一,引起各国政府和医学界的关注。随着世界人口中老年人的人口比重逐渐增大,AD患病率随年龄增高而增高,发病率也呈不断上升的趋势。年龄在65-85岁的人群当中患病率约为5%,年龄在85岁以上的人群当中患病率约40%。因此治疗AD所需要的费用有逐年飙涨的趋势,已经造成巨额的经济负担。而中国传统医药治疗AD具有经济、副作用少巍点。AD属于中医学“痴呆”范畴,针灸治疗本病疗效确切,针灸治疗阿尔兹海默病已经越来越受到国内外的关注,也对此进行了多方面的研究,而这些研究尚未完全证明针刺治疗阿尔兹海默病的有效性。本论文分为三部分,第一部分文献综述,第二部分实验研究,第三部分分析及讨论。文献综述一主要从现代生物医学和祖国中医药学两个角度对AD进行认识,并对AD的一般情况、病因、诊断、治疗等方面进行论述;文献综述二主要从现代针灸对于治疗AD的临床和实验研究两方面进行论述,进而了解现代针炙治疗AD的概况;文献综述三主要总结了近来几年AD的研究现状以及PS1和NCT两个重要靶点与AD发病的相关联系,从而了解PS1和NCT的研究进展及其在AD的发生发展过程中的作用。研究目的:从分子生物学和免疫学角度,研究脉冲电针的干预治疗对SAMP8模型小鼠脑内早老蛋白1(presenilian 1,PS1)和单次跨膜蛋白NCT(nicastrin)的含量和表达的影响,探讨早老蛋白1(presenilian 1,PS1)和NCT (nicastrin)的病理机制和电针治疗AD的作用机制。研究方法:将20只SAMP8小鼠(早老化小鼠)随机分为模型对照组、电针治疗组,每组10只;10只SAMR1小鼠(正常老化小鼠)组成正常对照组。正常对照组和模型对照组正常饲养15天,在电针治疗组治疗时抓取束缚一次,不做任何治疗;穴位参考《实验针灸学》中小鼠穴位定位,选取“百会”(小鼠顶盖正中)、“印堂”(小鼠两眼连线中点)、“人中”(唇裂鼻尖下1mm处)三穴,“百会”、“印堂”两穴针向鼻尖方向平刺,进针深度15-20 mm,“人中”穴点刺。接电“百会”、“印堂”,电针频率2 Hz,电流强度以小鼠头部微颤为宜,留针20 min,电针治疗结束后放回笼中。三组小鼠每日干预一次,连续干预15天。电针治疗结束后,通过Morris水迷宫实验观察小鼠的行为学变化;通过免疫组化观察SAMP8小鼠海马区PS1蛋白和NCT蛋白表达情况;通过Western blot方法检测各组小鼠海马区PS1蛋白和NCT蛋白含量变化。研究结果:①行为学检测中Morris水迷宫统计结果显示:模型组与正常对照组组比较逃避潜伏时增加,空间探索实验穿越平台次数和平台象限游泳时间明显减少(P<0.05,P<0.01);电针治疗组与模型组比较逃避潜伏时明显减少,空间探索实验穿越平台次数和平台象限游泳时间明显增加(P<0.05);②免疫组化观察各组海马区PS1蛋白和NCT蛋白表达情况,发现电针治疗组与模型组相比PS1蛋白和NCT蛋白表达明显减少;③Western blot检测各组海马区PS1蛋白和NCT蛋白含量,结果显示PS1蛋白和NCT蛋白在海马区相对含量,模型组高于正常对照组(P<0.01),而电针治疗组低于模型组(P<0.01)。实验结论:①脉冲电针能够有效的改善SAMP8小鼠的学习记忆能力。②③电针能够抑制SAMP8小鼠海马内PS1和NCT蛋白的表达并且能够降低其蛋白含量。
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