青霉素G酰基转移酶工艺过程研究

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阿莫西林是目前应用较广泛的β-内酰胺类抗生素之一。由于反应条件温和、污染少、转化率高等特点,酶法生产阿英西林成了人们争相研究的热点。在酶法工艺中,青霉素酰基转移酶是关键的催化用酶,因此,研究该酶的分离、纯化具有一定的理论和现实意义。本文主要对青霉素酰基转移酶的分离、纯化、固定化步骤进行了研究。   首先,通过对青霉素G酰基转移酶细胞破碎的方法研究,本文得到最佳方法为均质破碎,其中均质的最佳条件为:均质压力850bar,收率达到93.94%,比活为1.87U/mg。   其次,通过对熟处理工艺中时间和温度的摸索实验,本文得到热处理的最佳时间为60min,最佳温度为45℃。在硫酸铵沉淀工艺研究中,本文确定了硫酸铵沉淀的最佳饱和度为70%。   再次,通过对比进口和国产两种层析树脂,进口树脂层析平均收率为91.86%,国产树脂层析平均收率为89.42%,本文选择进口树脂进行层析。   最后,通过粒径、投酶比、盐浓度的对比,本文确定酶固定化时选用天津南开的ESR树脂,固定化过程中适宜的投酶比为60 U/g,适宜的盐浓度为1 mol/L。  
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