硫酸软骨素酶的发酵制备与分离纯化

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qaz370724qaz
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
硫酸软骨素酶(chondroitinase,ChSase),是一类主要存在于微生物体内,能将多种酸性粘多糖如硫酸皮肤素、硫酸软骨素、透明质酸等降解为寡糖及不饱和二糖的裂解酶。该酶在研究机体内硫酸软骨素糖胺多糖的功能、结构与分布方面、在治疗动脉粥样硬化、关节炎等方面有着广泛的应用前景,同时,也用于制备低分子量硫酸软骨素。低分子量硫酸软骨素对防治风湿性炎症和动脉粥样硬化方面相对于大分子量硫酸软骨素有更好的疗效。利用酶解法制备低分子量硫酸软骨素相对于目前广泛采用的物理降解法、化学降解法不需要较高的实验设备,也不会污染环境。因此,获得大量的酶活力高的ChSase具有重要的理论和现实意义,也是本实验的目的。因而本论文对产ChSase菌株的筛选、菌株产酶条件、菌株的鉴定、酶解产物等做了系统的研究。在本实验中,利用平板快速筛选和复筛从土壤中筛选出一株高产ChSase菌株,编号为12,通过对其形态和16SrRNA基因序列的比对,将该菌株鉴定为节杆菌属菌株(Arthrobacter sp.),产酶方式为分泌型表达。为了提高12号菌株的产酶水平,采用单次单因素实验方法对其碳源、氮源、无机盐及各发酵条件进行了研究,采用正交实验方法对碳源浓度、氮源浓度、无机盐浓度及pH进行了研究。得到的最佳培养基组分为(w/v):硫酸软骨素0.8%、KH2PO40.02%、酵母浸粉0.6%、MgSO4·7H200.8%、初始pH6;最适发酵条件为:按1.5%(v/v)接种量将种子菌液接入50ml/250ml的三角瓶中于25℃,150r/min振荡通气培养72h。以上述条件发酵培养食砜节杆菌时,酶活力可达3.981U/mL,为目前已报道的产酶活力较高的菌株。最后,本文初步分析了12号菌株产生的硫酸软骨素酶的酶解产物。质谱分析的结果显示,该酶降解硫酸软骨素的产物几乎全为单糖和二糖,有较高的纯度,测得的降解产物中二糖的相对分子质量约为458Da,单糖的相对分子质量为228Da。
其他文献
<正>经元善(1841—1903),原名高泉,字莲山(亦作莲山),号居易子、居易居子,晚号剡溪聋叟,笔名有沪滨呆子、汩罗江后学等。浙江上虞县人。他不仅是一位注重社会实践、富有实干
会议
本文就反刍动物后肠道的容积、食糜存留时间、微生物、淀粉及纤维物质的消化能力及影响因素、VFA的产生与吸收以及后肠道对碳水化合物消化能力与利用等方面进行了综述.后肠道
当今时代,社会各领域和互联网紧密融合,互联网为基础的各行业发展成为了主流。智慧旅游也走进了日常生活,旅游的各个方面,诸如旅游管理、旅游服务和旅游体验逐步实现智能化,
习近平多次提到"教书育人"这一重要命题。从立德树人的角度,提出"教师要时刻铭记教书育人的使命""坚持教书和育人相统一";从如何成为好老师的角度,提出"正确理想信念是教书育
对于土方计算工程,为保证土方量计算精度,可采用三角网法。具体的计算,可引入参考面,对于设计面为曲面时,可引入填挖方平衡面。
【正】 我院开办的各种不同类型的进修班,是高等中医药成人教育的一个重要组成部分。在日常的行政管理工作中,学员的请假问题,是令人十分头痛的问题,它关系到维持教学秩序,完
2010年是我国明代戏剧家汤显祖诞辰460周年。他为人正直,才华横溢,但仕途坎坷。他著作甚多,却以"临川四梦"四个剧本著称,成为明代戏剧史上的标帜。学界把研究汤显祖的学问称
伴随着国际经济一体化的推进和我国经济进入新常态,国内企业面临着日益严峻的市场考验。为了在复杂多变的经营环境中维持生存与发展,企业必须通过风险承担活动来加快资本积累,建立竞争优势,从而增加企业的市场价值,使得企业能够在激烈的市场竞争中不被淘汰。从社会层面来看,高水平的风险承担能够加快技术进步,提高社会整体的资源配置效率,推动我国经济结构实现转型升级。但从整体上观察,我国企业的风险承担水平普遍不高,与
信息技术的飞速发展已经深刻影响着人类社会。处于信息化浪潮和知识经济时代的企业,运用会计信息化能够提高工作效率,降低差错发生概率,提升企业经济效益,但会计信息化的实施