涎腺分泌功能障碍是临床上常见的疾病,现在还没有有效的治疗方法。根据组织工程学原理,人们设想体外构建人工涎腺来治疗这种疾病。根据这一设想,我们进行了如下的实验,研究体外构建人工涎腺的可能性。 本实验采用的方法是:首先获取新生SD大鼠幼崽颌下腺组织,经酶消化后体外培养,倒置显微镜、电镜下形态学及CK、淀粉酶抗体的免疫细胞化学染色观察。绘制生长曲线,对涎腺细胞的生物特征进行评价。然后,在体外培养的细胞中加入异丙肾上腺素,并采用免疫细胞化学的方法,用Brdu标记后检测颌下腺腺细胞的增殖活性,绘制生长曲线,测定腺上皮细胞的增殖能力。 然后用去污剂—酶联合多步法脱除家兔、SD大鼠气管组织中的细胞,并将处理后的气管组织进行组织学及材料表面拓扑结构的观察。将PGA(Polyglycolide)、脱细胞处理的衍生生物气管支架材料表面分别接种SD大鼠的颌下腺腺细胞,并进行体外培养,对其细胞上清液中淀粉酶含量、单位面积材料上生长的细胞数、材料上细胞的增殖能力(MTT法)等细胞生长情况、形态进行观察,进行材料细胞相容性研究。最后,将体外构建的颌下腺腺细胞/PGA管、颌下腺腺细胞/脱细胞气管人工涎腺样复合结构植入体内,观察颌下腺腺细胞在体内存活并发挥功能、体外构建涎腺组织的可能性。 以上实验研究表明:体外培养的颌下腺腺细胞经CK(anti-cytokeratin)及淀粉酶抗体染色,表现为阳性,体外培养的颌下腺腺细胞保持了其生物学特征。