蓝莓别名越橘,是杜鹃花科越橘属（Vaccinium.spp）,富含维生素、花色苷等多种酚类物质。花色苷具有广泛的生物学活性,例如抗氧化、抗炎、抗病毒、抗微生物、抗诱变、抗肿瘤等活性。本课题研究了蓝莓花色苷的高效提取和纯化工艺,并对提取物进行成分分析,后续还探究了提取物的体外抗氧化活性和对人视网膜色素上皮细胞的抗氧化保护,以期为蓝莓花色苷的开发利用提供技术参考,并为开发出新型预防及缓解视疲劳症状的功能食品,提供研究思路和理论基础。试验方法与结论如下:1.低温连续相变萃取蓝莓花色苷。利用课题组自主研发的低温连续相变萃取技术,通过正交试验,探索低温连续相变萃取蓝莓花色苷的最佳工艺。结果表明:萃取温度30℃,萃取溶剂75%乙醇,萃取时间120 min,原料堆密度0.3 kg/L,溶剂p H值为3.0。低温连续相变萃取蓝莓花色苷最高提取量达9.31 mg/g冻干蓝莓果。相较于普通乙醇浸提的花色苷提取量7.91 mg/g冻干蓝莓果,低温连续相变萃取工艺能够将蓝莓花色苷提取率提高了18%。2.蓝莓花色苷的纯化。首先采用乙酸乙酯对蓝莓粗提物进行萃取,得到花色苷粗提物纯度为7.62%。再通过对多种大孔树脂的纯化效果进行筛选,确定AB-8大孔树脂纯化蓝莓花色苷效果最佳,最优纯化条件为:上样浓度3 mg/g,p H值为3.0,上样速率2 m L/min,上样量230 m L,上样完成等待吸附平衡4 h,用50%乙醇溶液,p H值为3.0,上样速率2 ml/min,保持1.5 h解吸达到平衡。经过AB-8大孔树脂最优纯化条件下分离纯化后,花色苷纯度为56.24%,回收率73.20%,较纯化前提升了7.38倍,有效的除去了水溶性糖类和其他小分子物质。3.蓝莓花色苷的抗氧化活性及成分分析。分别采用水杨酸法检测羟基自由基清除能力,邻苯三酚自氧化法检测超氧阴离子清除能力,DPPH自由基清除能力测定及普鲁士蓝法检测还原能力,综合四种体外抗氧化模型试验结果,蓝莓花色苷清除羟基自由基的IC50为139.69μg/m L,Vc清除羟基自由基的IC50为150.62μg/m L;蓝莓花色苷清除超氧阴离子自由基的IC50为54.73μg/m L,Vc清除超氧阴离子自由基的IC50为21.15μg/m L;蓝莓花色苷清除DPPH自由基的IC50为40.37μg/m L,Vc清除超DPPH自由基的IC50为55.41μg/m L;实验范围内同等浓度作用下Vc还原能力远高于蓝莓纯化花色苷。确定蓝莓花色苷对比阳性对照品Vc的体外抗氧化能力极佳,特别是羟基自由基清除能力及DPPH自由基清除能力方面。并利用液-质联用仪检测分析本研究兔眼蓝莓品种中,花青素的种类主要有矢车菊类,锦葵类,牵牛花类和芍药类,各类花青素含量占花青素总量比较为矢车菊类（39.12%）＞锦葵类（36.91%）＞牵牛花类（18.08%）＞芍药类（5.89%）。4.蓝莓花色苷的视网膜色素上皮细胞体外抗氧化研究。分别进行:检测蓝莓花色苷安全浓度试验;叔丁基过氧化氢构建氧化损伤模型试验;蓝莓花色苷药物干预试验;体外细胞抗氧化（ROS、MDA、SOD）试验。结果确定:确定蓝莓花色苷提取物安全浓度为0-50μg/m L;采用200μmol/L叔丁基过氧化氢损伤24 h,构建氧化损伤模型;实验设预防组、应激组、修复组三组,分别观察蓝莓花色苷对损伤模型的保护作用,药物预防组保护作用最佳;采用不同浓度蓝莓花色苷以药物预防组的方式处理ARPE-19细胞,结果显示在高浓度剂量作用下,荧光强度为689±31,相较于氧化损伤模型组降低45.49%;在高浓度剂量作用下,MDA含量为4.2±0.15,相较于氧化损伤模型组降低31.37%;在高浓度剂量作用下,SOD活性为13.52±0.8,相较于氧化损伤模型组提升125.33%。表明蓝莓花色苷提取物可以降低氧化损伤后ARPE-19细胞中ROS及MDA水平,且增强细胞中SOD酶活力,并都呈现出一定的剂量依赖关系,证明了蓝莓花色苷提取物对RPE细胞的抗氧化保护作用。