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目的： 免疫系统发育异常及免疫系统的老化是许多老年相关性疾病、恶性肿瘤、心血管疾病及神经退行性疾病的重要发病原因。大量的研究表明FoxN1基因表达对免疫系统中的胸腺发育及T细胞生成具有关键作用。FoxN1主要表达在皮肤以及胸腺的上皮细胞(TECs)，对皮肤以及胸腺的上皮细胞发育起重要作用。先天的FoxN1基因变异会导致胸腺的上皮细胞(TECs)的发育障碍，出生后FoxN1基因表达过低导致胸腺萎缩，T淋巴细胞生成能力降低。FoxN1的表达随着年龄的增大而降低，FoxN1在老年个体中表达极微弱。因此我们通过内源性途径构建了FoxN1基因过表达小鼠来研究FoxN1基因过表达能否促进免疫系统的发育以及能否促进老化萎缩的胸腺再生。另外一些科研团队在年轻个体的血液中发现了循环因子能有效逆转组织老化。在老年小鼠模型中注射年轻的循环因子能有效改善老年骨骼肌、神经系统以及心肌系统的干细胞微环境，从而提高老化组织的干细胞再生能力使得这些老化的器官系统再生。这些环境循环因子可能是生长因子例如GDF11，或者可能是能调节基因表达的micro-RNA。因此我们通过外源性途径注射环境循环因子GDF11和Exosome研究其能否有效地逆转老化的免疫系统，并且减轻老年个体的慢性炎症反应，从而有效地发挥抗老化作用。 方法： 一、FoxN1基因条件性过表达小鼠构建 1.利用质粒重构等基因工程技术构建Rosa26-STOPflox-FoxN1转基因小鼠; 2.利用western blot和Southern Blot技术对构建后基因靶条带进行鉴定; 3.利用杂交技术获得多种不同的FoxN1条件性过表达转基因小鼠。 二、FoxN1基因过表达对免疫系统的发育的影响 1.采HE染色方法检测K14CreERT介导的FoxN1基因过表达小鼠的皮肤结构; 2.采用免疫荧光染色技术分析FoxN1TguCreERT小鼠的胸腺结构，并通过细胞流式分析确定FoxN1TguCreERT小鼠胸腺皮质/髓质的比例; 3.采用细胞流式染色分析胸腺T细胞各亚群的发育以及外周T细胞的功能活性; 4.采用Realtime-PCR分析FoxN1Tg在骨髓异位表达情况，并通过细胞流式分析FoxN1Tg在骨髓异位表达对骨髓及脾脏B细胞发育的影响; 三、外源性途径注射环境循环因子GDF11和Exosome后能否有效地逆转老化的免疫系统 1.通过对老年小鼠腹腔注射GDF11和Exosome，采用流式细胞术分析GDF11和Exosome对外周T细胞功能的影响; 2.采用Elisa分析外周血中炎症反应情况; 3.采用流式细胞术分析外周脾脏中炎症反应情况; 4.采用Realtime-PCR分析胸腺中的炎症反应情况。 结果： 一、通过内源性途径构建FoxN1基因过表达小鼠 1.利用基因工程技术成功构建了Rosa26-STOPflox-FoxN1转基因小鼠。 2.将Rosa26-STOPflox-FoxN1转基因小鼠与uCreERT、K14CreERT以及K5CreERT小鼠杂交，获得三种不同的FoxN1基因过表达小鼠。 二、FoxN1基因过表达能否促进免疫系统的发育以及能否促进老化萎缩的胸腺再生 1.K14Cre+介导的新生FoxN1过表达小鼠存在皮肤渗透性增加以及喂养方面缺陷导致其出生后24小时内死亡; 2.uCreERT介导的FoxN1过表达对幼年期胸腺发育成熟有不利的影响，并且导致外周T淋巴细胞功能退化; 3.幼年小鼠通过uCreERT调节外源FoxN1Tg在骨髓异位表达，影响B细胞的发育; 4.K5CreERT介导FoxN1过表达影响幼年小鼠胸腺和皮肤的发育，但对成年小鼠无不良影响; 三、外源性途径注射环境循环因子GDF11和Exosome后能否有效地逆转老化的免疫系统 1.年轻系统性环境循环因子GDF11和Exosome能逆转老化的T细胞免疫系统，促使老化萎缩的胸腺增大，T细胞生成能力提高，外周T细胞活性增强; 2.年轻系统性环境循环因子GDF11和Exosome能减轻老年个体存在的慢性炎症反应; 3.老年小鼠Exosome注射后胸腺内GDF11表达升高，提示Exosome可能是GDF11的上游调节因子，通过促进GDF11表达而发挥抗老化作用。 结论： 1.早期异位表达及大量过表达FoxN1基因会影响胸腺上皮细胞、T细胞、B细胞以及皮肤上皮细胞的发育，损害了免疫系统的正常发育。并且FoxN1基因对免疫系统的发育影响具有时间及组织特异性。由于FoxN1过表达小鼠早期死亡，无法观察FoxN1过表达能否促进老化萎缩的胸腺再生。 2.外源性腹腔注射年轻血清来源的环境循环因子GDF-11和Exosome能逆转老化的T细胞免疫系统，减轻老年个体存在的慢性炎症反应，发挥抗老化作用。