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害虫对杀虫剂的抗性是影响害虫化学防治效果的重要因子,了解害虫对杀虫剂产生抗性的机理也是害虫综合治理的重要组成部分。昆虫体内解毒代谢酶活性的上升是害虫对许多杀虫剂产生抗性的重要机制,人们研究最多的是多功能氧化酶、酯酶及谷胱甘肽S-转移酶等,这些酶对抗药性的贡献已经有很多的研究报道,但是在实际生产上也有许多抗药性的案例无法用这些代谢酶或靶标抗性来解释,可能还存在其他的代谢抗性机制。有研究报道昆虫葡萄糖基转移酶参与外源化合物的代谢,因此推测认为该酶与昆虫对杀虫剂的解毒代谢有关。本文主要建立昆虫UDP-葡萄糖基转移酶(简称UGT)活性测定方法,找到UGT酶活性测定的最佳条件;首次报道昆虫UGT酶活性的分布规律,并发现田间杀虫剂抗性种群UGT酶活性高于敏感种群;另外研究发现杀虫剂处理后昆虫UGT酶活性上调的现象。1.UGT酶活性的测定方法为了精确地测定UGT酶活性的大小,必须建立UGT酶活性测定的最佳条件。本文通过温度、pH、缓冲液、底物浓度、酶液浓度等条件的重复实验,比较得出UGT酶活性测定的最适条件。结果表明,采用动力学方法,在温度为37℃、pH=8.5、辅因子Mg2+=10mM、PBS为缓冲液的条件下,α-萘酚=100μM为底物、UDP-葡萄糖提供糖基,发生糖基转移反应,生成α-萘基葡萄糖苷,该糖苷在激发波长287nm和发射波长335nm、狭缝宽度为5nm的连续监测下,来检测荧光强度值的变化进而反应酶活性的大小。2.斜纹夜蛾UGT酶活性的分布由于本研究以农业重要害虫斜纹夜蛾为供试昆虫,所以必须对斜纹夜蛾UGT酶活性的分布情况做些必要的了解,为下面的实验选材做准备。本实验通过对斜纹夜蛾两个品系UGT酶活性的比较分析,发现田间抗性种群UGT酶活性高于敏感种群;通过对斜纹夜蛾不同虫态及不同组织UGT酶活性的比较,结果显示,斜纹夜蛾幼虫UGT酶活性明显高于斜纹夜蛾成虫、卵、蛹,并且斜纹夜蛾幼虫不同龄期之间UGT酶活性没有显著差异;斜纹夜蛾的中肠组织UGT酶活性最高,脂肪体次之,马氏管略低于脂肪体的,头部UGT酶活性最低。3.杀虫剂对斜纹夜蛾UGT酶活性的影响本文通过杀虫剂诱导以后测定UGT酶活性的变化,来推测UGT酶对杀虫剂的解毒代谢的贡献大小,进一步了解昆虫抗药性机制,可以为斜纹夜蛾以后的综合治理方面提供指导性意见,对害虫防治和抗性治理有着积极的意义。斜纹夜蛾对虫酰肼、氯虫苯甲酰胺、茚虫威、氰氟虫腙、硫丹、甲维盐、溴氰菊酯这七种药剂都产生了不同水平的抗性,在本文UGT酶活性诱导实验中,杀虫剂处理方式主要为浸虫法和浸叶法。结果显示,虫酰肼、氯虫苯甲酰胺、茚虫威、硫丹、甲维盐、溴氰菊酯六种杀虫剂对斜纹夜蛾幼虫处理后,UGT酶活性都有一定程度的上调,但是氰氟虫腙处理后,UGT酶活性几乎没有变化;不同杀虫剂处理后,UGT酶活性所发生的响应时间各不相同。