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目的:以中医学中的“肾藏精,主骨,生髓”为理论依据,通过实验研究观察左归丸含药血清对体外培养大鼠BMSCs向成骨细胞增殖分化的影响,同时观察细胞Hedgehog信号通路中的SHH、SMO、GLI1以及G蛋白偶联受体信号通路中的BMP2、GPR48等相关因子蛋白表达的变化,探究左归丸防治OP的相关效用机制,为临床治疗OP补充相对新颖的实验依据。材料与方法:将32只体重约为200-230g(3月龄)SPF级雌性未生育大鼠,随机分为正常组、诱导液组、福善美组、左归丸组4组,每组8只,将大鼠进行适应性饲养3天后,用每组相应的药物对实验大鼠进行连续灌胃,每天一次,连续5天,制备相应的含药血清。5天后将大鼠脱颈处死,进行取材,并留存4组大鼠的含药血清。将购得的Wistar大鼠BMSCs复苏、繁殖、传代,并将细胞分为4组。过滤含药学清,然后用含有对应组药物的含药血清的培养基体外培养大鼠BMSCs,一组加入诱导液,其它3组分别加入制备的含药学清。采用ELISA检测各组细胞Hedgehog信号通路中SHH、SMO、GLI1以及ALP、GPR48、BMP2等相关因子的蛋白表达情况,同时使用SPSS20.0软件进行统计分析,并将实验数据对比分析,从而比较各组含药血清对对BMSCs向成骨细胞分化的影响,探究左归丸防治OP的机制及影响程度的差异。结果:1.各实验组对细胞中ALP浓度的检测结果显示:与正常组比较,左归丸组、诱导液组、福善美组显著增长(P<0.01);第12天的检测结果对比第9、第15天成骨细胞分化相对较好。2.各实验组对细胞中GPR48浓度的检测结果显示:与正常组比较,左归丸组显著增长(P<0.01);与诱导液组、福善美组相比,左归丸组有显著差异(P<0.01)。3.各实验组对细胞中BMP-2浓度的检测结果显示:与正常组相比,诱导液组、左归丸组、福善美组BMP2明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高(P<0.01)。4.各组含药血清培养的大鼠BMSCs中SHH浓度的检测结果显示:与正常组相比,福善美组、左归丸组、诱导液组SHH明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高(P<0.01)。5.各组含药血清培养的大鼠BMSCs中SMO浓度的检测结果显示:与正常组相比,福善美组、左归丸组、诱导液组Smo明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高(P<0.01)。6.各组含药血清培养的大鼠BMSCs中Gl I1浓度的检测结果显示:与正常组相比,福善美组、左归丸组、诱导液组Gl I1明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高,甚则高于福善美组(P<0.01)。结论:1.正常大鼠BMSCs中可以表达ALP、GPR48、BMP2、SHH、SMO、GLI1,表明大鼠的细胞中存在GPR48信号通路和Hedgehog信号通路中相关信号因子。2.左归丸可以上调大鼠BMSCs中ALP、GPR48、BMP2、SHH、SMO、GLI1的蛋白浓度含量,表明左归丸可能是通过激活Hedgehog信号通路中的SHH、SMO、GLI1等靶基因,调节信号因子表达水平来达到防治骨质疏松症的目的。3.左归丸含药血清可以促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化再次得到证实,充分验证了“肾藏精,主骨,生髓”的肾-髓关系的科学性。