促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是哺乳动物应激反应的关键中枢神经系统调节剂,对脑功能至关重要(包括食欲控制,免疫功能,认知和运动行为),具有神经内分泌和神经递质的特性。CRH神经元在下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节中也起着重要的作用。前扣带回皮层对于执行功能、错误监控以及情绪处理尤为关键。因此,表征前扣带回皮层中CRH神经元的全脑传入途径可以扩展CRH神经元的分子功能和神经回路机制的相关知识领域。但是,目前传统的神经网络示踪手段无法对前扣带回皮层内特定神经元类型的输入和输出投射做出描述,而条件性复制表达的嗜神经病毒可以实现这一点。本文中,我们联合使用改良的狂犬病毒逆追踪系统和CRH-IRES-Cre小鼠品系,描绘前扣带回皮层中CRH神经元的全脑单突触输入。研究发现,前扣带回皮层CRH神经元整合来自皮质、丘脑、基底前脑、杏仁核、中脑和后脑以及其他一些脑区的传入信息。此外,为了鉴定对角带核区中被狂犬病毒标记的神经元细胞类型,我们利用乙酰胆碱转移酶(ChAT)进行了免疫化学染色,研究结果显示对角带核区内被狂犬病毒标记的神经元中存在ChAT+细胞即胆碱能类,占比大约30%。同时,我们利用酪氨酸羟化酶(TH)和色氨酸羟化酶2(Tph2)对腹侧被盖区、中缝正中核以及中缝背核中被狂犬病毒标记的细胞进行了神经化学表征,研究结果显示:(1)腹侧被盖区中没有观察到被狂犬病毒标记的神经元是TH+的;(2)中缝正中核以及中缝背核内被狂犬病毒标记的神经元存在Tph2+即5-HT能类,占比分别约为21%和73%。综上所述,我们的研究结果有效地映射出通过单突触输入投射到前扣带回皮层CRH神经元的各个脑区,并产生对前扣带回皮层CRH神经元的全脑单突触输入的定量和精确图谱;同时我们发现基底前脑和中缝核中的胆碱能系统和5-羟色胺能系统分别支配前扣带回皮层CRH神经元。这些结果显著扩展了对皮质GABA能神经元连接性的认识,并为将来探索皮质CRH神经元的环路功能提供了见解。